摘要背景:外阴阴道念珠菌病(VVC)是一种由念珠菌引起的常见妇科疾病,近年来患者逐年递增,而白色念珠菌为最常见致病菌。由于抗真菌药物的长期使用及不合理应用,导致念珠菌的耐药性问题日渐突出,给临床治疗带来了严峻挑战。因此,深入研究外阴阴道念珠菌病菌群特征及其耐药机制显得尤为重要。<br> 目的:了解本地区外阴阴道念珠菌病(VVC)的发生率以及感染的主要念珠菌种类,探讨VVC患者临床分离的白色念珠菌对常用抗真菌药物的敏感性。PCR扩增白色念珠菌的ERG5基因并测序分析,探讨白色念珠菌ERG5基因突变是否与其耐药性有关。<br> 方法:采集2018年6月-12月妇产科门诊就诊患者的阴道分泌物,涂片镜检、CHROMagar念珠菌显色培养基培养获得285株念珠菌,再通过真菌快速培养鉴定/药敏试验获得156株白色念珠菌及其体外药敏试验结果,并且对这156株白色念珠菌再次进行质谱鉴定。最后采用PCR技术扩增白色念珠菌ERG5基因并测序分析其突变位点。<br> 结果:初次检出的285株真菌中,白色念菌株156株(54.7%)、光滑念珠菌64株(22.5%)、热带念珠菌47株(16.5%)、克柔念珠菌12株(4.2%)和其他真菌6株(2.1%)。MALDI-TOF MS对156株初筛的白色念珠菌进行再次补充鉴定,结果显示有1株菌无法可靠鉴定出结果(质谱评分低于1.700分),其余均为白色念珠菌。白色念珠菌体外药敏试验显示,155株白色念珠菌均对5-氟尿嘧啶(5-FC)敏感,对两性霉素(AMB)、制霉菌素(NYS)敏感性达99.3%和98.7%,对酮康唑(KET)、氟康唑(FIU)、伊曲康唑(ITR)、伏立康唑(VOR)、克霉唑(CLO)、米康唑(MIC)、益康唑(ECO)耐药率分别为43.59%、62.82%、61.54%、50.64%、50.64%、51.92%和51.28%。挑选7株白色念株菌PCR扩增并测序分析,在同一位点检出2个ERG5基因突变,其中一个为同义突变(G528A),另一个为错义突变(G528C)。<br> 结论:(1)本院VVC患者白色念珠菌的构成比呈下降趋势,而非白色念珠菌逐渐上升。<br> (2)当传统表型鉴定难以确定时,可通过质谱技术补充鉴定。<br> (3)白色念珠菌对5-FC、AMB、NYS高度敏感,而对唑类药物耐药性增高,并存在交叉耐药和多药耐药现象。<br> (4)白色念珠菌ERG5基因528位点突变可能与唑类药物的耐药性有关。
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