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摘要目的:血管内皮细胞(vascular endothelial cells，VECs)损伤在动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)的发病机制中起着重要作用，而VECs自噬水平的适度调节可以减轻细胞损伤，对AS的发展具有保护作用，但其调节机制还未被阐明。MicroRNAs是一类新发现的表观遗传调控因子，通过特异性下调靶基因的转录后表达参与调控细胞的增殖、分化和凋亡等多种生物学过程。冠心病患者外周血microRNA-214-3p（miR-214-3p）水平已被报道与病情严重程度相关，但内皮特异性表达的miR-214-3p在AS中的作用还没有研究。本研究旨在探讨miR-214-3p是否参与AS斑块内皮细胞的自噬调节并阐明其机制，以期为AS的治疗提供新的干预靶点。<br>　　方法:一）体内实验:使用高脂喂养ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠12周作为AS模型;利用流式细胞仪分选出CD31+的主动脉弓段VECs后，我们检测了细胞中miR-214-3p的表达水平和自噬相关基因(autophagy-related genes，ATGs)的蛋白表达水平，并分析了miR-214-3p与ATG5和ATG12蛋白水平的相关性;进行生物信息学分析和双荧光素酶报告基因测定确认miR-214-3p的靶基因;二）体外实验:用100μg/mL氧化低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein，ox-LDL）刺激人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells，HUVECs)12h，然后转染miR-214-3p模拟物/抑制剂，采用western blotting检测自噬相关蛋白表达水平;采用透射电子显微镜(transmission electron microscopy，TEM)观测胞质内自噬体数目变化;免疫荧光检测胞质内蛋白微管相关蛋白1轻链3B-Ⅱ(proteinmicrotubule-associated protein l light chain3B-Ⅱ，LC3B-Ⅱ)的表达量及分布;油红O染色检测胞质内脂质积累情况;检测细胞对THP-1单核细胞的粘附能力;CCK-8检测细胞活力，TUNNEL实验检测细胞凋亡，同时检测caspase-3/cleaved caspase-3蛋白水平。<br>　　结果:在AS小鼠模型中，我们发现血管损伤处VECs中miR-214-3p表达水平显著上调，伴随自噬相关蛋白水平明显下调;相关性分析显示miR-214-3p与ATG5和ATG12蛋白水平呈负相关（R=0.461，p=0.003; R=0.412，p=0.013）;在体外实验中，我们观察到ox-LDL可以诱导群体倍增数(Population Doublings，PDL)为5的年轻HUVECs的自噬，同时miR-214-3p水平降低;过表达miR-214-3p可以抑制ox-LDL诱发的自噬，表现为ATG5、ATG12-ATG5、ATG12和LC3B-Ⅱ蛋白水平下降，SQSTM1/P62蛋白水平升高，胞质内LC3B-Ⅱ荧光强度减弱及自噬体数目减少;过表达miR-214-3p可以降低PDL5 HUVEC的细胞活力，并增加细胞凋亡;此外，miR-214-3p还能促进胞质中脂质积聚和THP-1细胞粘附;相反，在PDL36的衰老HUVECs中，ox-LDL刺激后表现为细胞自噬被抑制，同时miR-214-3p水平升高;低表达miR-214-3p可以恢复ox-LDL抑制的自噬，增加细胞活力，减少细胞凋亡，同时胞质中脂质积累和THP-1细胞粘附均减少。<br>　　结论:在小鼠AS模型中，血管损伤处miR-214-3p水平显著上升，其水平与自噬蛋白ATG5和ATG12水平负相关;体外实验中，miR-214-3p可以通过抑制HUVECs中ox-LDL刺激的自噬水平，从而损伤内皮细胞功能，其作用可能是通过直接靶向作用于ATG5实现的，该调节途径可能为治疗AS中内皮细胞的损伤提供新的靶点。