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摘要心肌纤维化(MF)是慢性心功不全难以逆转的原因之一，且MF的程度决定着患者的预后。因此预防和逆转MF成为心力衰竭治疗的重点之一。心肌成纤维细胞是MF主要效应细胞，其过度增殖和胶原蛋白合成降解失衡是MF初始因素。RAS系统在促进MF发生发展过程中有着重要作用。AngⅡ可以激活TGF-β1信号，增加胶原蛋白合成，在MF和心肌重塑中起着关键作用。AngⅡ主要与ATⅠ受体结合。缬沙坦是高选择的ATⅠ受体拮抗剂，能够阻断AT1受体促进细胞增长、促进醛固酮释放和收缩血管的作用。线粒体单链DNA结合蛋白1(SSBP1)，属于单链DNA结合蛋白家族。通过与线粒体单链mtDNA结合，在线粒体DNA复制、重组和修复中发挥重要作用。研究发现SSBP1可能是TGFβ-1的负调控因子，并在心肌成纤维细胞活化中起到抑制作用。P53是一种转录因子，主要作用在于在维持线粒体功能，调控细胞增殖和分化。有研究发现SSBP1可以通过乙酰化增强P53稳定性。因此推测可以通过SSBP1/P53抑制心肌纤维化。<br>　　第一部分 小鼠心肌纤维化模型制备<br>　　目的：采用外源性给与Angll的方法制备小鼠心肌纤维化模型。<br>　　方法：C57BL/6J水鼠，23只，皮下置入ALzet2002200ul渗透泵。对照组(n=12)，泵入稀释后乙酸。实验组(n=11)泵入乙酸稀释的AngⅡ，1.44μg/g/d，2周后检测小鼠血压，心脏超声相关指标。处死小鼠，制备心脏组织切片行天狼星红染色并测定胶原染色面积。<br>　　结果：AngⅡ能够使小鼠收缩压升高，心脏重量增加，室壁增厚。实验组心肌组织切片胶原纤维染色面积为19.4％，对照组为42.1％。(P＜0.05)<br>　　第二部分 缬沙坦通过SSBP1抑制AngⅡ诱导的心肌纤维化<br>　　目的：①探究SSBP1是否参与MF。②缬沙坦是否通过SSBP1干预MF。<br>　　方法：C57BL/6J小鼠，植入ALzet2002200ul渗透泵，对照组(n=12)，泵注稀释后乙酸;实验组(n=11)泵注AngⅡ;缬沙坦组(n=11)泵注AngⅡ+灌注缬沙坦(40mg/kg/d)。泵注量1.44μg/g/d，2W。①心肌组织切片行天狼星红苦味酸染色，用图像J软件定量染色面积。②检测心肌COLIA1、COL3A1、SSBP1蛋白（WB法）和mRNA（qRT-PCR法）。③检测心肌组织线粒体功能。包括比色法测柠檬酸合成酶、ComplexⅠ和ComplexⅢ、GSH-Px活性。和NBT法测SOD活性。qRT-PCR法测Nox1和Nox4mRNA。④分离并培养MCFs分4组：空白对照;AngⅡ0.5umol/l组;AngⅡ1.0umol/l组;AngⅡl.0umol/l+缬沙坦1.0umol/l组：WB法检测组COL1A1、COL3A1、NOX1、NOX4以及SSBP1蛋白。<br>　　结果：①与对照组相比较，AngⅡ使得胶原蛋白染色面积、COL1A1和COL3A1mRNA以及蛋白表达增加。柠檬酸合成酶、复合物Ⅰ和复合物Ⅲ、SOD和GSH酶活性降低;Nox1和Nox4mRNA表达增加。SSBP1表达减少。②相比于实验组，缬沙坦组胶原蛋白染色面积、COL1A1和COL3A1mRNA以及蛋白表达明显减少。柠檬酸合成酶、复合物I和复合物ni、SOD和GSH酶活性增加：<br>　　Noxl和Nox4mRNA合成降低;但是SSBP1表达则有所增加。<br>　　第三部分 P53和SSBP1对AngⅡ刺激的MCFs增殖能力和胶原蛋白合成的影响<br>　　目的：明确SSBP1是否能够通过P53抑制AngⅡ诱导的MCFs增殖和胶原蛋白表达。<br>　　方法：①沉默(感染SSBPlshRNA)和上调SSBP1（转染PCDNA3.1SSBP1），分别在有和没有AngⅡ刺激的情况下，MCFs增殖能力（MTT法）、Ⅰ型Ⅲ型胶原蛋白表达、NADPH氧化酶NOX1和NOX4合成、以及P53蛋白表达的变化（蛋白检测使用WB法）。②感染Ad-P53-GFP上调P53，分别在有和没有AngⅡ刺激时，MCFs增殖能力、COLIAI和COL3A1、NOX1和NOX4表达的变化。<br>　　结果：①沉默SSBP1，P53蛋白合成减少，并使得AngⅡ诱导的MCFs增殖和胶原蛋白表达更加明显：上调SSBP1，P53蛋白合成增多，并使得AngⅡ诱导的MCFs增殖和胶原蛋白表达受到抑制。②调控SSBP1不影响Nox1和Nox4表达。③上调P53可抑制MCFs增殖和胶原蛋白表达。<br>　　全文结论：1.AngⅡ诱导的MF中SSBP1表达受抑制。<br>　　2.缬沙坦能够抑制胶原蛋白表达和ROS激活，通过增加SSBP1表达拮抗AngⅡ诱导的MF。<br>　　3.SSBP1是通过P53抑制AngⅡ诱导的MCFs增殖和胶原蛋白表达。<br>　　4.SSBP1抑制MF与ROS途径无关。