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摘要RPS6KA2(ribosomal protein S6kinase,90kDa,polypeptide2,RSK3)基因是编码丝氨酸和苏氨酸激酶的RSK（核糖体S6激酶）家族的成员。RPS6KA2激酶含有2个不相同的激酶催化结构域，通过磷酸化不同底物参与细胞生长和细胞分化等多种生理生化活动。本实验室以前的研究结果显示，细丝蛋白A(Filamin A,FLNA)对RNA聚合酶Ⅰ(PolⅠ)和RNA聚合酶Ⅲ(PolⅢ)所指导的基因转录具有抑制作用，但其调节机制还不完全清楚。最近mRNA-seq分析表明，在FLNA敲低的SaOS2细胞中RPS6KA2mRNA表达量显著提高。通过检测不同细胞的FLNA shRNA稳定表达细胞系，进一步确定FLNA能抑制RPS6KA2的表达。以前的研究表明，Ras和ERK参与PolⅠ和Ⅲ介导的基因表达，而RPS6KA2是ERK信号通路中效应子之一.这些信息提示RPS6KA2可能参与PolⅠ和PolⅢ所指导的基因转录调节。<br>　　为了研究RPS6KA2是否参与了PolⅠ和PolⅢ指导的基因转录，通过基因克隆的方法制备了RPS6KA2shRNA表达载体并利用此载体建立相应的稳定表达细胞系。利用RT-qPCR及Western blot方法检测RPS6KA2shRNA稳定细胞系中PolⅠ和PolⅢ的基因表达;同时，使用细胞计数法和MTT比色法检测细胞增殖的变化。结果表明，RPS6KA2敲低导致PolⅠ和PolⅢ指导的部分基因表达水平和细胞增殖显著下降，提示RPS6KA2对PolⅠ和PolⅢ指导的基因表达具有促进作用。为了进一步验证这个发现，随后建立了RPS6KA2过表达稳定细胞系，RT-qPCR结果表明，RPS6KA2过表达导致PolⅠ及PolⅢ指导的一部分基因的表达水平和细胞增殖显著增加。以上结果证明RPS6KA2能够正调节PolⅠ及PolⅢ指导的基因转录和细胞增殖。为了探究RPS6KA2调控PolⅠ和PolⅢ指导的基因转录的分子机制，利用RPS6KA2shRNA稳定细胞系和Western blot实验技术检测RPS6KA2敲低细胞系中参与调节PolⅠ和PolⅢ基因转录的相关转录因子和信号通路蛋白，结果显示，在RPS6KA2shRNA稳定细胞系中信号通路蛋白RhoA和转录因子C-MYC表达显著降低，提示RPS6KA2可能通过调节Rho A和C-MYC间接调节PolⅠ和Ⅲ基因转录。<br>　　总之，RPS6KA2能正调节聚合酶PolⅠ及PolⅢ所指导的基因转录和细胞增殖，而且RPS6KA2的调控作用可能是通过调节RhoA和C-MYC的表达实现的。本课题的发现拓展了对RPS6KA2在细胞中的调节作用和PolⅠ和Ⅲ转录机制的了解，为癌症细胞增殖的机制提供新视角。