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摘要在程序性坏死课题中，我们致力于寻找调控程序性细胞坏死通路的潜在蛋白，为我的博士开题和考核课题。近年来，研究发现程序性细胞坏死是一种新型的自主的受信号调控的新型死亡方式。当细胞凋亡被抑制时，程序性细胞坏死作为凋亡替补而被激活，通过RIP1和RIP3激酶传递死亡信号，研究表明其在神经退化性疾病，肿瘤转移，自身免疫性疾病等疾病中有着非常重要作用。然而，其信号通路调控蛋白，从死亡信号的引发者，到最终的执行蛋白，均了解甚少。我们借助于高通量筛选和RNA干扰技术，筛选特定感兴趣的基因组去鉴定关键性调控程序性细胞坏死的蛋白，发现泛素化基因，如Skp2，Fbxo15和CCNF，均值得后续验证，以及GPCR和离子通道的一些蛋白在程序性细胞坏死中也可能扮演着很关键的角色，这些蛋白的发现，为未来疾病的研究和药物开发提供潜在的靶点和治疗方向。<br>　　第二个课题是我研究的主要课题，着手于探讨转录因子Miz1在肠道内的功能。肠道自我更新最活跃，阻挡病原体入侵，是机体内非常关键的物理性屏障。然而，肠道的稳态维持和损伤再修复的机制目前并不完全清楚。我们发现，Miz1蛋白对肠道干细胞的自我更新以及细胞存亡和增殖有着非常重要的作用，在肠道的稳态维持和损伤再修复中均至关重要，而且我们发现Miz1在肠道中的作用并不依赖于该蛋白的核内转录因子的功能。在小鼠肠道上皮细胞中，特异性地组成性敲除全长Miz1后，小鼠胚胎致死，而诱导性敲除全长Miz1后，小鼠迅速死亡。而不管是组成性地，还是诱导性地特异性敲除负责核内转录因子功能的Miz1的POZ结构域后，小鼠正常发育，新生小鼠的基因型符合孟德尔概率，这表明全长Miz1对于肠道的发育必不可少，不依赖于其核内转录功能。进一步发现，敲除全长Miz1后，小肠的绒毛-隐窝结构被完全破坏，在隐窝处，能观察到细胞凋亡显著增多，细胞增殖显著减弱。隐窝区域的ERK1/2和JNK信号通路被抑制，肠道干细胞以及肠道前体细胞的转录水平改变。最后，发现在辐射损伤模型中，诱导型肠道特异性全长Miz1敲除后，小鼠肠道无法进行损伤再修复，而敲除POZ后，小鼠肠道正常重建肠道隐窝，肠道再生。总之，我们发现Miz1是肠道干细胞的自我更新的新型调控蛋白，通过调控ERK1/2和JNK通路，对肠道的稳态维持和损伤再修复至关重要，为肠道疾病提供了新的治疗靶点，可能在肠癌中有着重要的临床意义。