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摘要第一部分:输血相关急性肺损伤大鼠模型的建立及可溶性CD40配体在其中的作用<br>　　研究背景和目的:输血相关急性肺损伤(transfusion-related acute lung injury，TRALI)是输血导致的严重肺部并发症，已成为输血导致死亡的主要原因之一，然而其具体的发病机制尚未完全阐明。可溶性CD40配体(soluble CD40 ligand，sCD40L)是血制品在存储过程中衍生的炎性介质并且参与多种输血不良反应的发生。本研究拟建立临床相关的TRALI大鼠模型并在该模型中探究sCD40L在TRALI中的作用。<br>　　方法:研究选用Lewis大鼠，制备大鼠悬浮红细胞，4℃保存0-35d备用，并通过红细胞形态学改变、血液学指标、生化指标及代谢指标对储存不同时间的红细胞进行质量评估。通过创伤-失血-大量输血法建立TRALI大鼠模型，以大鼠股动静脉置管作为创伤打击，采集大鼠全血的30％作为失血打击，经历1h休克期后予大鼠补液、输血，将受血大鼠随机分为5组[Day14、Day21、Day28、Day35及生理盐水(normal saline，NS)组]，分别予各组大鼠输注保存14d、21d、28d、35d的大鼠悬浮红细胞或等量NS。通过急性肺损伤(acute lung injury，ALI)三大主要特点:肺损伤病理学改变、肺泡毛细血管屏障通透性改变及肺损伤相关炎性反应的发生验证建模是否成功。通过酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)检测库血及受血大鼠血浆中sCD40L含量评估sCD40L在TRALI中的作用。<br>　　结果:红细胞在存储过程中发生了一系列形态学及生理学改变，随存储时间的延长，红细胞的存储损伤逐渐加重。输注保存35d悬浮红细胞的大鼠肺组织可见大量中性粒细胞浸润且肺泡间隔明显增厚;Day35组大鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid，BALF)中总蛋白含量、伊文思蓝染液(Evans blue dye，EBD)漏出量、肺损伤相关炎性因子表达量显著增加(P＜0.05)。库血中sCD40L含量随存储时间的延长而逐渐增加(P＜0.05)，受血大鼠血浆中sCD40L含量仅轻度增加且各组间无显著性差异(P＞0.05)。<br>　　结论:通过创伤-失血-大量输血法成功建立TRALI大鼠模型;sCD40L在TRALI的发生中可能具有一定作用。<br>　　第二部分:输血相关急性肺损伤小鼠模型的建立及血管内皮生长因子在其中的作用及相关机制<br>　　研究背景和目的:输血相关急性肺损伤(transfusion-related acute lung injury,TRALI)是输血导致的严重肺部并发症，已成为输血导致死亡的主要原因之一，但其病理生理学机制尚未完全阐明，目前也尚无有效地特异性防治措施。肺泡毛细血管屏障的破坏是TRALI发生的共同途径。血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factorA，VEGFA)是调节血管通透性的关键效应分子，可通过其主要信号传导受体(VEGF receptor2，VEGFR2)发挥生物学效应。本研究拟建立TRALI小鼠模型并在该模型中探究VEGFA在TRALI中的作用及可能存在的相关机制。<br>　　方法:研究选用BALB/c小鼠，将小鼠随机分为4组(Na(i)ve组、LPS对照组、同型对照组、TRALI组)，通过腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)联合尾静脉注射MHCI类抗体(34-1-2S)建立TRALI小鼠模型。通过急性肺损伤(acute lung injury，ALI)三大主要特点:肺损伤病理学改变、肺泡毛细血管屏障通透性改变及肺损伤相关炎性反应的发生验证建模是否成功。通过Westemblot法检测小鼠肺组织VEGFA及VEGFR2信号通路蛋白表达量评估VEGFA在TRALI中的作用及VEGFR2信号通路活化情况。<br>　　结果:与其余各组相比，TRALI组(LPS+34-1-2S)小鼠存在明显的呼吸困难，且活动量明显减少，小鼠死亡率显著增高(P＜0.01)，肺体积明显增大，肺组织表面可见明显淤血改变，镜下可见肺泡间隔明显增厚，肺泡腔内有大量均匀红染物质(水肿液)，肺组织存在大量中性粒细胞浸润，肺组织湿干重比、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid，BALF)中总蛋白含量、肺损伤相关炎性因子表达量显著增高(P＜0.05)。TRALI组小鼠肺组织VEGFA表达量显著高于其余各组(P＜0.05)，VEGFR2-SRC-AKT信号通路存在明显活化;VEGFR2-MAPKs信号通路存在部分活化。<br>　　结论:联合LPS和MHCI类抗体成功建立TRALI小鼠模型;VEGFA在TRALI的发生中可能具有一定促进作用，该作用可能是通过调节VEGFR2信号传导通路实现的。