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摘要目的:<br>　　DAXX(Death domain-associated protein)作为凋亡调节因子和转录调节因子，在人体的多种生理、病理反应中具有十分重要的功能。目前围绕DAXX调节细胞凋亡的报道已非常广泛，其中涉及的分子机制也已进行了十分深入的研究。近年来，人们发现DAXX在肿瘤的发生发展过程中同样具有调节功能，然而该分子在胃癌中的作用尚不明确。因此，本研究意在探索并揭示DAXX在胃癌发生、发展中所发挥的作用。<br>　　方法:<br>　　(1)我们利用Westernblot检测了DAXX在83对临床病人的胃癌组织和癌旁组织中的表达，然后根据病人的临床分期进行分类和统计，以此来探究DAXX的临床意义。<br>　　(2)为检测DAXX对胃癌细胞的影响，我们选择了三株人胃癌细胞系:MKN45、N87和AGS，并对DAXX和肿瘤干细胞标志物CD44、CD24、OCT4的表达进行检测。除此之外，我们利用慢病毒在人胃癌细胞系中进行DAXX过表达或敲低，检测DAXX对CD44、CD24、OCT4表达量的影响。<br>　　(3)我们在人胃癌细胞系中对DAXX进行过表达和敲低，并检测胃癌细胞迁移、侵袭能力的变化。同时检测DAXX对胃癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响。<br>　　(4)为探究DAXX通过何种方式影响胃癌细胞的EMT。我们检测了过表达和敲低DAXX后的胃癌细胞中SNAI、ZEB、GRHL2等EMT相关因子表达的变化;<br>　　(5)我们利用IP、ChIP、免疫荧光等技术，进一步探究DAXX影响人胃癌细胞中EMT相关因子的分子机制。<br>　　(6)我们对DAXX过表达和敲低后的胃癌细胞进行了裸鼠皮下的肿瘤异种移植实验、软琼脂集落形成实验以及化疗药物的耐药实验，以探究DAXX对胃癌细胞潜在致瘤性以及干细胞特征的影响。<br>　　结果:<br>　　(1)通过检测83对临床样本中DAXX的表达量，我们发现在不同分期的胃癌病人样本中，DAXX相对表达量存在显著差异，且从Ⅰ期至Ⅳ期呈下降趋势。<br>　　(2)q-PCR结果显示，在人胃癌细胞系MKN45、N87和AGS中，DAXX的表达量与肿瘤干细胞标志物CD44、OCT4的表达量呈负相关。DAXX过表达可抑制CD44和OCT4的表达，同时促进CD24的表达，并使CD44high/CD241ow细胞所占比例显著降低，而敲低则诱导相反的效应。<br>　　(3)划痕愈合实验和Transwell的实验结果说明，DAXX过表达对胃癌细胞的迁移、侵袭能力具有抑制作用，同时抑制胃癌细胞的EMT。DAXX的敲低则对其具有促进作用。<br>　　(4)在过表达或敲低DAXX的胃癌细胞中检测EMT相关因子，我们发现DAXX抑制SNAI等EMT促进因子的表达，对GRHL2等EMT抑制因子的表达具有促进作用。<br>　　(5)DAXX可与HDAC1结合并形成复合物，将HDAC1迁移到细胞核，HDAC1在细胞核中通过降低组蛋白H3K14位点的乙酰化水平，抑制SNAI3的转录，从而抑制胃癌细胞的EMT。<br>　　(6)DAXX抑制胃癌细胞的集落形成能力，并使胃癌细胞对化疗药物更加敏感。裸鼠皮下成瘤实验显示，DAXX过表达抑制了MKN45的在裸鼠皮下的成瘤能力;AGS在1×107个细胞的注射量下不具备成瘤能力，然而，在AGS细胞中对DAXX敲低后，可形成肉眼可见的肿瘤。<br>　　结论:DAXX在晚期胃癌样本中的相对表达量下调，其在胃癌细胞的表达量与干细胞标志物呈负相关趋势。DAXX抑制胃癌细胞的迁移、侵袭能力、自我更新能力以及潜在致瘤能力，同时减少胃癌细胞对化疗药物的耐受。DAXX与HDAC1形成复合物，并将HDAC1迁移到细胞核，HDAC1在细胞核中通过对组蛋白H3K14位点去乙酰化，抑制SNAI3的转录，从而抑制胃癌细胞的EMT。综上所述，DAXX作为一种肿瘤抑制因子，抑制胃癌的潜在致瘤性和转移能力。