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摘要表观遗传改变与肿瘤发生发展密切相关，组蛋白甲基转移酶EZH2催化H3K27me3行使基因沉默功能。研究表明，EZH2基因激活和失活突变、EZH2过表达、H3K27去甲基转移酶UTX的突变等相关调控异常与包括肝癌在内的各类型肿瘤密切相关。肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一，其分子病理机制和分子分型尚不清晰。本课题发现EZH2在肝癌中过表达，且与病人的预后和生存期呈负相关。进一步通过研究EZH2及其抑制剂在肝癌中的潜在作用，明确EZH2抑制剂敏感性的蛋白或相关信号通路，并设计针对性的联合用药治疗肝癌的策略。首先，检测21株已建系肝癌细胞株和5株肝癌病人来源细胞株对EZH2抑制剂GSK126和EZP-6438的敏感性，根据敏感性差异对肝癌细胞进行EZH2抑制剂敏感性分群。对于敏感细胞，EZH2抑制剂可以抑制细胞克隆形成;对于不敏感细胞，EZH2抑制剂可以促进细胞的克隆形成。进一步以分群的肝癌细胞为工具，通过比较蛋白质组学和RNA-seq分析EPZ-6438处理不同群体细胞后的差异基因，找到关键信号通路Wnt/β-cateninsignalingpathway在不同群体中有显著差异。W进一步研究发现，GSK126和EPZ-6438可以上调不敏感细胞株中β-catenin蛋白水平，增加细胞核中β-catenin含量。同时，作为Wnt通路的下游，Notch通路的活化可以促进不敏感细胞株表面表达EpCAM和CD133表面标志物，增加干性特征。利用裸小鼠皮下移植瘤模型进一步验证EZH2的表达及其抑制剂对两类肝癌细胞体内生长的作用。综上所述，肝癌细胞对EZH2抑制剂的敏感性差异显著，其中Wnt/β-catenin通路的应激变化是调节肝癌细胞敏感性的关键。结合相关发现，设计基于机制联合用药方案，EZH2抑制剂和Wnt抑制剂协同作用，可以显著抑制细胞增殖的效应。本课题扩展EZH2抑制剂的应用范畴，对EZH2抑制剂在肝癌中的应用具有重要转化意义，同时为肝癌病人的治疗提供指导。