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摘要氯胺酮是一种广泛应用在人类和兽医临床上的麻醉药物。它通常用于儿科病人和幼年动物手术麻醉等不同的适应症中。然而在身体发育期，暴露于麻醉药物下可能会对幼儿及幼龄动物的生长发育和神经系统造成严重的副作用。氯胺酮在肝脏中被微粒体酶广泛代谢成代谢物，这些代谢物会损害肝实质细胞及其他肝脏细胞。近年来，体内体外的多种动物模型疾病通过细胞焦亡等病理机制发生发展逐渐成为研究的关注点。在细胞焦亡途径中，最重要的组成部分就是NLRP3炎性小体，它也是目前研究最广泛，最有特征性的炎性小体。炎性小体激活后通过促进炎性因子的释放而造成细胞焦亡。氯胺酮麻醉产生的肝毒性可能与细胞焦亡相关途径有关。MCC950和VX765作为两种细胞焦亡途径中的抑制剂，其中MCC950可以通过抑制NLRP3激活，而VX765可以通过抑制Caspase-1发挥作用而能够有效抑制细胞焦亡发生的进程。但对于这两种抑制剂能否对氯胺酮诱导的肝脏细胞焦亡发挥保护作用，目前还研究较少且机制尚不清楚。因此，本实验分为两部分，首先选取7日龄大鼠对其进行氯胺酮麻醉，探究其可能产生的肝毒性。确定造成肝损伤后，应用MCC950和VX765两种抑制剂探究其对幼龄大鼠氯胺酮麻醉产生的肝毒性是否能够起到保护作用。从而为降低麻醉药物对幼龄病患动物的影响提供新的治疗靶点，为以后相对安全麻醉方式提供理论支撑。<br>　　第一部分试验将7日龄大鼠随机分为2组，对照组(C组)与氯胺酮组(K组)。C组大鼠为生理盐水对照组，K组大鼠腹腔注射氯胺酮(剂量为20mg/kg，每90min注射一次，维持幼龄大鼠处于麻醉状态，氯胺酮注射5次，麻醉时间共7.5h);第二部分试验将幼龄大鼠随机分为6组，C组与K组与第一部分相同，MCC950抑制剂组(M组:10mg/kg)与VX765抑制剂组(V组:25mg/kg)同样采取腹腔注射方式给药，氯胺酮+MCC950抑制剂组(KM组)与氯胺酮+VX765抑制剂组(KV组)各注射两种药物。抑制剂配制好后提前半小时给药，给药方式同K组。麻醉结束后收集大鼠肝脏组织和血液。根据肝脏功能指标变化、炎性因子的表达情况以及HE染色评估肝损伤情况;采用免疫组织化学染色方法检测焦亡关键蛋白NLRP3、ASC、Caspase-1以及GSDMD的蛋白表达量;采用qRT-PCR法检测焦亡相关基因NLRP3、ASC、Caspase-1和GSDMD的mRNA表达量;应用Westernblot检测信号通路中NLRP3、ASC、Caspase-1和GSDMD蛋白表达变化。<br>　　试验结果表明:<br>　　(1)本试验中，氯胺酮致使K组肝脏组织发生明显病变，肝细胞结构排列混乱，肝细胞出现肿胀，可观察到多处肝细胞炎性浸润，而在加入MCC950和VX765抑制剂后，能够显著缓解肝组织的损伤程度。肝细胞肿胀得到减轻，肝细胞仍呈索状排列，出现少量的炎性浸润现象。<br>　　(2)K组血清中炎性因子水平呈现显著升高趋势(P＜0.01)。在加入抑制剂后，KM与KV两组相比K组均呈现降低趋势(P＜0.01)，M、V组与C组相比无明显差异(P＞0.05)。<br>　　(3)氯胺酮麻醉使幼龄大鼠肝脏中MDA含量上升，GSH含量和SOD活性下降，MCC950和VX765抑制剂预处理能缓解氧化应激程度。<br>　　(4)氯胺酮长时间麻醉或暴露导致幼龄大鼠焦亡相关蛋白表达量增加。K组7日龄大鼠肝组织中NLRP3、ASC、Caspase-1和GSDMD蛋白表达量显著升高(P＜0.01);KM、KV组中相对K组蛋白表达量显著降低(P＜0.05)<br>　　(5)与C组相比，K组NLRP3、ASC、Caspase-1与GSDMDmRNA表达显著升高(P＜0.01)。而在KM组与KV组中出现了显著的下降趋势(P＜0.01)。<br>　　结果表明:氯胺酮能够通过诱导细胞焦亡造成幼龄大鼠肝损伤，MCC950与VX765抑制剂可有效减轻幼龄大鼠对于氯胺酮暴露造成的肝损伤，并产生保护作用。