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摘要TREK-1通道是双孔钾离子通道(Two-pore-domainK+channel，K2P通道)中TERK家族中的一员，主要以二聚体形式发挥生物功能。TREK-1通道在中枢神经系统和心肌细胞中有着较高丰度的表达，能够参与疼痛感知、情绪调控、麻醉反应、心脏机械电反馈、血管舒张等生理过程。由于TREK-1通道参与诸多重要的生理过程，其与许多疾病的发生密切相关，如缺血性脑血管病、癫痫、抑郁症等。TREK-1通道能够受到多种化学刺激和物理刺激调控。近年来发现一些小分子化合物和线性小肽spadin能够作用于TREK-1通道，但是能够作用于该通道具有三级结构的多肽仍未见报道。<br>　　肩突硬蜱(Ixodes scapularis)体内含有丰富的活性物质，越来越多的研究者将目光聚焦在蜱虫活性物质的研究。目前研究发现这些活性物质具有抗凝血、抗菌等重要功能，肩突硬蜱是一种极具研究价值的资源宝库。<br>　　肩突硬蜱来源的成熟多肽7901具有89个氨基酸，能够形成四对分子内二硫键。在本文的研究中，通过原核表达的方式得到了多肽7901的重组蛋白，通过His-Tag亲和层析、肠激酶酶切、SephadexG-75葡聚糖凝胶分离、反相高压液相色谱(RP-HPLC)等纯化方法并经过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定得到了含有四对二硫键的多肽7901。<br>　　本文利用全细胞式膜片钳技术，发现多肽7901能够浓度依赖性抑制TREK-1通道，其半抑制浓度IC50为23.46μM。为了进一步研究多肽7901对离子通道的选择性，在本文的研究中对电压门控钠通道、钾通道以及钙离子通道和氯离子通道进行了检测，发现该多肽对Nav1.3、Nav1.4、Nav1.5、Nav1.7、Kv1.5、Kv2.1、Kv4.1、BK通道、Cav3.1、TMEM16A通道没有明显作用，同时发现多肽7901对TREK-1通道的亲和力远大于K2P通道中的KCNK3、KCNK9、KCNK18。在本文的研究中发现多肽7901对TREK-1通道的抑制呈非电压依赖性，该多肽能够快速地与TREK-1通道结合并且也能被快速洗脱，同时发现该多肽能够抑制被花生四烯酸激活的通道的开放状态。此外，在弱酸性环境下，多肽7901对通道的抑制活性显著增强，与pH7.4的条件下相比多肽7901与TERK-1通道的亲和力提高5倍。进一步的研究发现，影响通道质子化的H142位点电荷性质的变化并不会影响多肽7901对TREK-1通道的抑制作用。在本文的研究中，发现多肽7901在抑制TREK-1通道时其结合方式与氟西汀相比有很大的不同，这提示着多肽7901在抑制TREK-1通道时可能存在着不同的结合位点，在后续工作中将进一步探究其结合位点。<br>　　本文首次通过原核表达获得了肩突硬蜱源性多肽7901，发现其能够选择性地抑制TREK-1通道，在弱酸性条件下多肽7901对TREK-1通道的亲和力显著增加，多肽7901与氟西汀作用于通道的方式有着明显的不同。本研究对TREK-1通道结构和功能的研究具有一定的参考意义。