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摘要赭曲霉毒素A(OchratoxinA，OTA)是一种存在于食物和动物饲料中常见的霉菌毒素，其对人畜的危害是全球关注的公共卫生问题，引起了人们的重视。以往的研究表明，OTA具有肾毒性、肝毒性、遗传毒性、免疫毒性、细胞毒性和神经毒性。近年来，越来越多的研究指出了OTA的肠道毒性，但其作用机制尚未阐明，使得其肠道毒性的机制研究变得愈发重要。肠道屏障是机体抵御外来污染物的第一道屏障，承担了机体70％的免疫防御功能，其中肠道上皮细胞和紧密连接（Tight junction,TJ）在维持肠道物理屏障功能中发挥了重要作用。本文利用转录组学和全转录组学揭示OTA损伤体外模型Caco-2细胞和体内模型Balb/c小鼠的肠道物理屏障的机制。<br>　　1.分别用0.0005、0.005和4μg/mL的OTA处理分化Caco-2细胞48h后，细胞凋亡呈剂量依赖性，转录组学分析显示共有10090个差异表达基因（Differential Expression Genes，DEGs），主要聚集在两个下调模式中。对这两个模式中的DEGs进行GO和KEGG富集分析发现，这些DEGs主要富集在p53信号通路、细胞周期和MAPK信号通路等。OTA引起的肠道功能损伤可能部分与细胞凋亡有关，OTA通过下调MDM2和上调CASP3蛋白，激活p53介导的细胞凋亡信号通路，从而诱导分化Caco-2细胞发生凋亡。<br>　　2.3mg/kg b.w.OTA灌胃Balb/c小鼠28天后，其体重从灌胃第7天开始显著下降。血清生化指标显示OTA显著升高了与肠道通透性和肠道损伤相关的D-乳酸和肠型脂肪酸结合蛋白的水平。此外，OTA组的小鼠绒毛高度以及杯状细胞的数量显著低于对照组。全转录组学分析显示，共鉴别到差异表达（Different Expression，DE）的mRNA619个，DEmiRNA71个,DElncRNA493个，DEcircRNA144个。生物信息学分析表明，OTA改变了与TJ蛋白相关的mRNAs(FZD4、Wnt5a、Axin2、Cav1、ACTG1和CCND1)的表达，这些mRNA受到一些关键lncRNAs(Zeb1、Stk36、Phkb、Prss23、Inpp5e和Gm28588)和关键miRNAs（miR-1258-x、mmu-miR-1258-3p）的调控，从而激活了Wnt/Ca2+信号通路。通过竞争性内源RNA(competing endogenous RNA，ceRNA)分析，确定了参与调控TJ的关键RNAs，lncRNA Zeb1通过靶向miR-1258-x:1）调节FZD4与Wnt5a结合从而释放Ca2+;2)调控Cav1的表达，控制细胞外Ca2+的内流，降低TJ蛋白的表达，损伤TJ和肠道屏障功能。体外Caco-2细胞试验证实，OTA诱导的Ca2+水平升高降低了TJ蛋白的表达。<br>　　综上所述，本文以研究OTA的肠道物理屏障损伤作用为目的，构建了体外Caco-2细胞和体内Balb/c小鼠的试验模型，结果表明OTA损伤了肠道物理屏障功能。通过转录组学和全转录组学技术手段，成功挖掘了OTA诱导的肠道物理屏障毒性的潜在机制。这些结果为OTA的肠道毒理机制提供了强有力的体内和体外毒性数据支撑，将有助于我们找到OTA损伤肠道屏障的靶点，为预防OTA的肠道毒性提供依据。