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摘要2020年中国癌症新发病例457万例，其中胃癌48万，居第三位;因癌死亡人数300万，其中胃癌37万，居第三位。中国胃癌发病率和死亡率均将近全球胃癌人数的一半，且胃癌患者五年生存率低，预后差，易发生肿瘤转移，因此迫切需要对胃癌进行系统性研究，尤其是抑制胃癌转移及增殖，提高病人的术后生存率等关键环节，研究意义重大。<br>　　肿瘤免疫治疗是通过重新启动并维持肿瘤-免疫循环，恢复机体正常的抗肿瘤免疫反应，从而控制和清除肿瘤的一种治疗方法。其中，免疫检查点阻断是指通过阻断免疫抑制通路，激活免疫相关细胞的免疫治疗方法，主要包括PD-1/PD-L1通路，CTLA4通路阻断。但由于缺少相应的Biomarker、肿瘤高度异质性的特点、耐药等问题，免疫检查点抗体抑制剂在胃癌、食管癌等实体瘤上单药治疗时的响应率(10％～35％)有限。<br>　　组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶LSD1(Histone lysine (K)-specific demethylase1)，可去除H3K4(Histone3 lysine4)的单双甲基化。研究表明LSD1是乳腺癌、前列腺癌、肺癌等多种恶性肿瘤的关键调控因子，可促进肿瘤的迁移、侵袭以及干细胞特性。LSD1在多种癌症病人组织中高表达，可作为临床研究的潜在治疗靶点，已有多个靶向LSD1的抑制剂进入临床研究阶段。<br>　　课题组前期证实LSD1在胃癌中高表达，同时有研究表明LSD1抑制剂可以增强免疫治疗的效果，提高免疫治疗响应率。因此，LSD1可作为胃癌免疫治疗的潜在靶点，其抑制剂可能对免疫治疗的响应具有重要作用。我们收集了363例胃癌病人组织，通过免疫组化分析发现胃癌组织中PD-L1和LSD1的表达量明显高于癌旁组织，且二者表达量呈显著正相关(r=0.44，p＜0.001)因此我们猜测LSD1与PD-L1在胃癌中可能具有正向调控关系。我们选择了前期筛选出的活性较好的新型吩噻嗪类LSD1抑制剂D1研究其抗肿瘤活性及相关免疫调控机制。首先在分子水平上验证了化合物D1对LSD1的抑制活性及结合能力，结果表明化合物D1可有效抑制LSD1的酶活性(IC50=246.8±2.422nM)，以非时间依赖的方式抑制LSD1酶活，并且化合物11与LSD1以快结合快解离的方式直接相互作用，亲和力KD=2.896*10-6M。细胞水平研究表明化合物D1可促进LSD1底物H3K4单双甲基化积累，抑制胃癌细胞的迁移侵袭以及自我更新能力。此外，化合物D1以浓度依赖的方式抑制PD-L1的表达，并且能有效抑制PD-L1与PD-1的结合，促进T细胞对胃癌细胞的杀伤能力并且能促进T细胞分泌杀伤相关因子TNFα(TumorNecrosisFactorα)、IFNγ(Interferonγ)。动物水平上通过小鼠皮下移植模型，发现化合物D1可有效抑制肿瘤增殖，促进CD8+T细胞、CD4+T细胞、CD3+T细胞的肿瘤浸润及细胞因子IFNγ、IL-2分泌。以上结果表明化合物D1通过阻断免疫检查点蛋白PD-L1的表达，促进T细胞的活化和TNFα、IFNγ、IL-2等肿瘤致死因子的分泌来抑制肿瘤细胞生长。<br>　　综上所述，本课题发现了新型吩噻嗪类LSD1抑制剂D1通过抑制LSD1活性下调PD-L1表达，促进免疫细胞对胃癌细胞的杀伤功能，增强免疫应答，最终抑制胃癌的发展。本课题探索了LSD1抑制剂在胃癌治疗过程中的新机制，进一步证实LSD1可能作为胃癌免疫治疗的潜在靶点，为胃癌靶向治疗方案提供了新的思路及理论基础;同时化合物D1的发现为LSD1抑制剂的研发提供了新型活性骨架及抗肿瘤生物活性依据。