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摘要背景与目的<br>　　卵巢癌(ovariancancer,OC)是妇科常见的三大恶性肿瘤之一，死亡率在妇科恶性肿瘤中居首位。卵巢癌患者的早期症状不明显，大部分患者确诊时即为晚期，缺乏有效的治疗手段，患者的5年生存率低，预后较差。因此，急需寻找新的药物治疗靶点，改善患者预后。抗沉默功能1B(Anti-SilencingFunction1B，ASF1B)蛋白是组蛋白H3-H4的分子伴侣蛋白，研究发现ASF1B在前列腺癌、子宫内膜癌、乳腺癌、肾透明细胞癌、宫颈癌等恶性肿瘤的发生发展中起关键作用，而且ASF1B的高表达与患者的不良预后密切相关。但是，ASF1B在卵巢癌中的作用尚不明确，因此本研究主要探讨ASF1B在卵巢癌中的作用及意义。<br>　　方法<br>　　利用GEPIA、TCGA数据库中信息分析ASF1B在卵巢癌组织和正常卵巢组织中的表达水平。收集2019年01月至2020年01月于郑州大学人民医院妇产科行手术治疗的60例卵巢癌患者，术后免疫组化确诊为原发卵巢癌的组织，并收集60例同期行手术切除的正常卵巢组织。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测卵巢癌组织及正常卵巢组织中ASF1B的表达水平，并分析ASF1B表达与临床病理指标之间的相关性。采用蛋白免疫印迹实验(WesternBlot)和qRT-PCR检测不同卵巢癌细胞系(SKOV3、A2780、ES-2和COC-1细胞)和正常卵巢细胞(IOSE-80细胞)中ASF1B和ASF1BmRNA的表达水平。设计ASF1BsiRNA并转染SKOV3和A2780细胞，采用qRT-PCR和WesternBlot法检测ASF1BsiRNA的转染效率，构建ASF1B敲除细胞系。应用CCK8细胞增殖实验和细胞集落形成实验检测ASF1BsiRNA转染对卵巢癌细胞增殖和克隆形成能力的影响。采用Transwell实验检测ASF1BsiRNA转染对卵巢癌细胞侵袭能力的影响。采用流式细胞术检测ASF1BsiRNA转染对卵巢癌细胞周期及细胞凋亡的影响。采用WesternBlot法检测ASF1BsiRNA转染后卵巢癌细胞中凋亡相关蛋白及PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白的表达水平。<br>　　结果<br>　　1.与正常卵巢组织相比，ASF1B在卵巢癌组织中表达水平明显升高(P＜0.001)。ASF1B表达与患者的FIGO分期、肿瘤大小、淋巴结转移有关(P＜0.05)，与患者年龄、病理组织学类型无关（P＞0.05）;<br>　　2.与正常卵巢细胞相比，ASF1B在多种卵巢癌细胞系中表达水平明显升高(P＜0.01）;<br>　　3.在A2780和SKOV3细胞中，ASF1BsiRNA转染后可明显抑制ASF1BmRNA及蛋白表达(P＜0.0001);<br>　　4.在A2780和SKOV3细胞中，siRNA-ASF1B组相比对照组细胞的增殖及克隆形成能力明显降低(P＜0.001)、侵袭能力明显降低(P＜0.001）;<br>　　5.在A2780和SKOV3细胞中，siRNA-ASF1B组相比对照组G1期细胞数量明显增加(P＜0.001)，G2和S期细胞数量明显减少(P＜0.05），siRNA-ASF1B组细胞凋亡数量较对照组明显增加(P＜0.0001);<br>　　6.在A2780和SKOV3细胞中，siRNA-ASF1B组细胞相比对照组Bax、裂解caspase-3表达明显增加，Bcl-2、Mcl-1表达明显减少;<br>　　7.在A2780细胞和SKOV3细胞中，siRNA-ASF1B组相比对照组p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、PDK1蛋白表达水平均明显降低。<br>　　结论<br>　　1.ASF1B在卵巢癌组织中高表达，并与患者的FIGO分期、肿瘤大小、淋巴结转移密切相关，影响患者预后;<br>　　2.ASF1B在卵巢癌细胞中高表达，通过促进细胞增殖、侵袭，抑制细胞凋亡，参与卵巢癌的发生发展;<br>　　3.ASF1B通过PI3K/AKT/mTOR信号通路参与卵巢癌的发生发展;<br>　　4.ASF1B有望成为卵巢癌新的药物治疗靶点及预后指标。