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摘要研究背景与目的:<br>　　骨髓增生异常综合征(myelodysplasticsyndromes，MDS)是一组起源于造血干/组细胞的异质性恶性克隆性疾病，且高风险向急性髓系白血病(AML)转化。MDS患者的髓系细胞发育异常，主要表现为无效造血及难治性血细胞减少。大颗粒淋巴细胞白血病(Largegranularlymphocyteleukemia，LGLL)是一种少见的克隆性淋巴细胞增殖性疾病，2016年WHO将其归类于成熟T细胞和自然杀伤细胞肿瘤。MDS合并LGLL发病率低，近20年来，仅31例患者被报道患有MDS并发LGLL(MDS-LGLL)。与MDS患者相比，MDS-LGLL患者血红蛋白水平更低，红系发育不良更为常见。目前，MDS-LGLL患者的基因突变数据非常有限，机制尚不明确。本研究中，我们不仅描述了10例MDS-LGLL病例的临床及实验室特征，而且通过全外显子测序技术(Whole-exomesequencing，WES)对MDS-LGLL患者的突变基因进行了更深入和全面的分析。研究目的:提高对MDS-LGLL病例临床、实验室特征的认识，通过全外显子测序技术分析MDS-LGLL病例的基因突变特征。<br>　　方法:<br>　　1.描述10例MDS-LGLL患者的临床指标及实验室检查结果;<br>　　2.描述10例MDS-LGLL患者的病理特征及免疫、分子表型;<br>　　3.通过二代测序技术对10例MDS-LGLL患者DNA进行检测，报告了与血液系统疾病发生密切相关的114个基因的突变情况;<br>　　4.对单例MDS-LGLL患者分别在早期诊断为MDS时期及确诊为MDS-LGLL时期的两份骨髓样本进行全外显子测序，分别对突变基因及进行Geneontology(GO)富集分析、蛋白相互作用网络分析及差异基因富集分析;<br>　　5.分别对三例MDS-LGLL患者的骨髓样本进行全外显子测序，对三例患者的共有突变基因进行GO分析、KEGG分析和蛋白质相互作用网络分析，筛选出特征突变及对突变基因进行功能预测。<br>　　结果:<br>　　1.描述了10例MDS-LGLL患者的临床及实验室特征;<br>　　2.10例MDS-LGLL患者的二代测序显示:在与血液系统疾病发生密切相关的114个基因中，共发现了37个基因的突变。其中，组蛋白修饰基因ASXL1(3/10，30％)和粘连蛋白复合物基因STAG2(3/10，30％)突变率最高;<br>　　3.单例MDS-LGLL不同时期样本全外显子测序对比显示:MDS进展到MDS-LGLL的过程中，H3K4单甲基化通路富集明显增加、ZAP-70易位通路富集明显减少。<br>　　4.对三例MDS-LGLL全外显子测序数据分析发现:MF组突变基因富集最明显的通路主要集中于ATP结合、DNA结合转录因子活性通路，为RNA聚合酶2特异性、组蛋白结合、组蛋白去甲基化酶结合、H3K4组蛋白甲基转移酶活性等通路;BP组突变基因富集最明显的通路是主要集中于RNA聚合酶2负性转录调控通路、DNA模板转录调节、细胞分化调控、组蛋白H3K4单甲基化、二甲基化、T细胞分化正向调节等通路;在CC组，突变集中富集最明显的通路在细胞核、细胞质膜、线粒体、转录调节复合物、组蛋白甲基转移酶复合物等。KEGG富集分析显示突变基因富集最多的通路是:代谢相关通路、肿瘤相关通路、PI3K-AKT通路、MAPK通路、Th17、Th1、Th2细胞分化、PD-L1表达和PD-1检查点通路等。<br>　　5.用三个在线蛋白质功能预测网站Provean,Sift,Polyphen-2对筛选出的50个突变频率最高的共有突变进行突变功能预测，发现CCL3L1c.272T＞C位点和RGPD5c.3131C＞G位点基因突变在三个网站均显示为有害突变。通过Sanger测序验证，10例MDS-LGLL患者CCL3L1c.272T＞C位点和RGPD5c.3131C＞G位点的突变率分别为50％、70％。<br>　　结论:<br>　　MDS和LGLL可以共同发生，但发病率较低且机制尚未明确。MDS-LGLL患者中，最多见的MDS亚型为MDS-MLD，所有MDS-LGLL患者均发生了贫血和红系发育不良。组蛋白修饰基因ASXL1(3/10，30％)和粘连蛋白复合物基因STAG2(3/10，30％)是114个基因中突变率最高的基因。MDS进展到MDS-LGLL的过程中，H3K4单甲基化相关基因富集增加，但ZAP-70易位相关基因富集减少。CCL3L1c.272T＞C位点和RGPD5c.3131C＞G位点突变均为有害突变，在10例MDS-LGLL患者的突变率为50％、70％。