摘要糖茶藨子(Ribeshimalense)为虎耳草科(Saxifragaceae)茶藨子属(Ribes)落叶小灌木,藏药中多用于清热解毒,治疗各种炎症,收敛血管病等。然而关于糖茶藨子的现代化学成分及药理活性报道甚少,其药效物质基础尚不明确。本论文主要围绕糖茶藨子中抗氧化活性成分展开研究,采用在线HPLC-DPPH活性筛选系统,结合中、高压液相色谱,建立了一种在线色谱识别-靶向富集-定向分离的高效分析分离自由基抑制剂技术。并取得以下成果:(1)采用聚酰胺中压色谱分离方法对糖茶藨子茎叶乙醇提取物进行前处理,单次样品上样量达到1.9g;采用SphericalC18中压色谱分离方法对糖茶藨子Fr3进行前处理,单次样品上样量达到0.8g;分析结果表明,聚酰胺中压色谱柱与SphericalC18中压色谱柱载样量大,重现性好,回收得到的各组分之间交叉现象不严重,实现了预处理效果。<br> (2)通过将两台HPLC相连建立在线HPLC-DPPH活性筛选系统,在液相色谱水平上完成了对糖茶藨子中具有自由基清除活性成分的快速定性识别,能够高效的指导自由基抑制剂的分离以及活性验证工作。<br> (3)建立中/高压模式,反相/反相模式,反相/亲水模式,针对糖茶藨子不同组分中的自由基抑制剂进行靶向富集,定向分离。<br> (4)从糖茶藨子中共分离鉴定出18个自由基抑制剂,包括1个苯丙素类化合物以及17个黄酮类化合物,均为首次从该植物中分离得到,其中3个为二氢黄酮醇类新化合物。<br> 本论文建立的在线HPLC-DPPH活性筛选系统结合中、高压液相色谱的方法能够快速识别并分离糖茶藨子中的自由基抑制剂,对于今后糖茶藨子化学成分及质量标准研究具有重要意义;分离得到的3个二氢黄酮醇类新化合物以及其他的单体化合物展现出了良好的自由基清除活性,为进一步探讨糖茶藨子的生物活性提供了参考。
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