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疤痕成纤维细胞的cDNA表达谱分析及人类LATEXIN的克隆,表达及特性研究

摘要用基因芯片分析肥厚性疤痕与正常皮肤成纤维细胞在静息及TGF-β刺激下的表达谱的改变.正常成纤维细胞在TGF-β3刺激前后的一达谱与肥厚性疤痕成纤维细胞在TGF-β3刺激前的表达变正相关(r=0.76037),刺激后2种成纤维细胞的表达差异与肥厚性疤痕成纤维细胞TGF-β3刺激前后的表达谱差异正相关(R=0.826762).构成以上差异的基历有620条,涉及细胞骨架蛋白、细胞周期蛋白、细胞因子、受体、转录因子及糖、蛋白质和核到代谢的酶类;未发现Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达水平的改变.cNDA基因芯片分析表明,ECV304细胞、纤维母细胞中有较高水平的表达,在部分肝,肺癌中发现表达水平较高.ORF克隆到表达质粒pQE30,高水平表达一27.45kd的蛋白质,经His Trap亲合层分离后质谱分析证实.其在体外可与羧肽酶A相互作用,而对羧肽酶B无作用.psort2蛋白定位分析提示该蛋白无明确的细胞器定位信号.将ORF克隆到pGEFP-C1及pGEFP-N3转染COS7细胞发现其呈全细胞弥散性分布.

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