摘要一、 断藤益母汤调控VEGF通路抑制CIA小鼠血管翳的形成<br> 目的:探讨断藤益母汤抑制CIA小鼠血管翳形成的作用及机制。<br> 方法:SPF级DBA/1雄性小鼠24只,7-8周龄,随机分为四组,分别是空白组(NC组)、模型组(CIA组)、甲氨蝶呤组(MTX组)、断藤益母汤组(DTYM组),每组六只。除正常组外,其余组别小鼠均给予胶原与佐剂的乳化剂造模。自二次免疫起,给予灌胃等体积溶媒和药物,连续灌胃给药35天。观察小鼠的一般情况、关节炎指数。二次免疫35天后取膝、踝关节进行膝、踝关节micro CT扫描,以及进行膝、踝关节HE和番红固绿染色并观察其病理改变,用免疫组织化学方法检测CD31、VEGF-α、VEGFR2、P-VEGFR2的表达。检测CIA小鼠血浆中miR-337-3p的表达。<br> 结论:DTYM可能通过调控CIA小鼠VEGF通路来起到抑制血管翳形成的作用,并且DTYM能够上调CIA小鼠中miR-337-3p的表达。<br> 二、 断藤益母汤抑制体外HUVEC模型细胞活化的研究<br> 目的:验证断藤益母汤抑制体外HUVEC模型细胞活化的作用及机制。<br> 方法:采用CCK-8法检测DTYM对HUVEC细胞活力的影响,EDU细胞增殖检测试剂盒检测HUVEC细胞增殖能力,Transwell迁移法及鬼笔环肽荧光染色法检测细胞迁移功能,基质胶法检测对HUVEC细胞管形成能力。RT-qPCR检测HUVEC粘附因子E-selectin、ICAM1和VCAM1的mRNA表达。免疫印迹法检测DTYM对HUVEC细胞相关活化蛋白(VWF、CD31、ANG-1、CYR61)和VEGF信号通路蛋白表达的影响,细胞免疫荧光检测DTYM对HUVEC中CD31蛋白的表达。<br> 结论:DTYM可能是部分通过上调miR-337-3p的表达,来抑制VWF、CD31、CYR61、Ang-1的表达,以及抑制VEGF通路的激活来调控内皮细胞的活化,从而达到抑制CIA小鼠血管翳生成的作用。
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