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摘要疟疾、艾滋病和结核病是全球三大主要公共卫生威胁。疟疾临床症状可见发热、贫血及肝、脾明显肿大、恶心、呕吐和直立性低血压等。恶性疟原虫是可感染人的疟原虫中最致命的一种，每年有40多万人死于疟疾，主要由恶性疟原虫感染引起。寄生虫共感染是指在同一宿主体内同时存在两种或两种以上寄生虫感染的情况。在疟疾传播的热带和亚热带地区，蠕虫感染也十分普遍，两者在地理分布上高度重叠。因此，疟原虫和蠕虫共感染现象在这些地区十分多见。旋毛虫（Trichinella spiralis）是引起人兽共患旋毛虫病的常见病因。旋毛虫的生活史复杂，宿主感染后经历肠道期、肠外期和囊包形成期。目前有关旋毛虫与疟原虫共感染对疟疾免疫病理调节的研究尚少。<br>　　目的:<br>　　研究慢性旋毛虫（T.spiralis，Ts）感染对伯氏疟原虫（Plasmodium berghei ANKA，PbA）共感染小鼠免疫病理的调节及其机制，为疟疾的免疫防治提供科学依据。<br>　　方法:<br>　　1.建立旋毛虫和伯氏疟原虫共感染小鼠模型将60只SPF级雌性昆明小鼠(6～8周，体重18～22g)随机分为4组，每组15只，其中每组10只小鼠用于观察生存率。小鼠分组如下:对照组(Naive组):不做任何实验处理;Ts单感染组（Ts组）:口饲感染30条Ts幼虫;PbA单感染组（PbA组）:于实验第121天腹腔注射0.1ml含1×106个感染PbA的红细胞的PBS缓冲液;Ts+PbA共感染组（Ts+PbA组）:口饲感染30条Ts幼虫后于第121天腹腔注射0.1ml含1×106个感染PbA的红细胞的PBS缓冲液。<br>　　2.小鼠生存状况及外周血红细胞感染率检测每天观察小鼠的生存状况，自PbA感染后的第3天开始隔日检测小鼠的外周血红细胞感染率。<br>　　3.对实验动物脏器取材、染色观察和检测<br>　　3.1 于感染Ts后第135天和/或感染PbA后第15天剖杀小鼠，剖杀前称取小鼠体重，剖杀时分别称取肝脏、脾脏和胸腺的重量，分别计算肝脏、脾脏和胸腺指数。<br>　　3.2 于感染Ts后第135天和/或感染PbA后第15天剖杀小鼠，取肝脏组织进行H&E染色观察组织病理变化;天狼星红染色观察肝脏组织纤维化水平;免疫组化染色观察肝脏组织中中性粒细胞和枯否氏细胞的平均光密度值。<br>　　3.3 于感染Ts后第135天和/或感染PbA后第15天剖杀小鼠，取脑、肺和小肠组织进行H&E染色观察组织病理变化。<br>　　3.4 于感染Ts后第135天和/或感染PbA后第15天剖杀小鼠，取脾脏组织进行NF-κB免疫组化染色，采用qRT-PCR检测脾脏组织中Toll样受体(toll-like receptors，TLRs)，即TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8、TLR9、TLR11和TLR12的mRNA表达水平。<br>　　3.5 于感染Ts后第135天和/或感染PbA后第15天剖杀小鼠，心脏采血，分离血清，采用ELISA检测血清中分别针对疟原虫抗原、旋毛虫幼虫抗原以及疟原虫与旋毛虫肌肉期幼虫混合抗原的特异性IgG、IgG1、IgG2a和IgG2抗体的OD值。<br>　　结果:<br>　　1.预先慢性旋毛虫感染并不能延长伯氏疟原虫共感染小鼠的生存时间，但能降低小鼠外周.血红细胞疟原虫的感染率。慢性旋毛虫感染可在一定程度上减轻伯氏疟原虫共感染小鼠的胸腺萎缩、脾脏肿大以及肝、脑和肺的病理损伤，但可加重小肠的病理损伤。<br>　　2.慢性旋毛虫感染可减轻伯氏疟原虫共感染小鼠肝脏病理损伤、炎症细胞浸润以及脏器内疟色素的沉积。天狼星红染色结果显示，与PbA组小鼠相比，Ts+PbA组小鼠肝脏天狼星红染色阳性面积显著升高。免疫组化染色结果显示，与PbA组小鼠相比，Ts+PbA组小鼠肝脏枯否氏细胞的平均光密度值显著升高。<br>　　3.对慢性旋毛虫与伯氏疟原虫共感染小鼠脾脏组织TLRs的mRNA表达水平和NF-κB的平均光密度值检测显示，与PbA组小鼠相比，Ts+PbA组小鼠脾脏中TLR2、TLR3和TLR6的mRNA表达水平、NF-κB的平均光密度值均显著降低。推测慢性旋毛虫共感染可能通过抑制小鼠脾脏中TLR2、TLR3、TLR6和NF-κB的表达，发挥免疫调节作用。<br>　　4.对各组小鼠血清中特异性IgG、IgG1、IgG2a和IgG2b抗体测量结果显示，PbA单感染组和Ts+PbA共感染组小鼠血清中的抗旋毛虫幼虫与疟原虫混合抗原的特异性IgG、IgG1、IgG2a和IgG2b抗体的OD值均显著高于正常组和Ts组(P＜0.05)。与PbA单感染组相比，Ts+PbA共感染组血清中的抗PbA抗原的特异性IgG、IgG1、IgG2a和IgG2b抗体OD值均无显著性差异(P＞0.05)。与Ts单感染组相比，Ts+PbA共感染组血清中的抗Ts幼虫抗原的特异性IgG、IgG1、IgG2a和IgG2b抗体OD值显著升高(P＜0.05)。提示慢性旋毛虫与伯氏疟原虫共感染可增加小鼠抗旋毛虫感染的抗体水平。<br>　　结论:<br>　　1.慢性旋毛虫感染可以在一定程度上降低伯氏疟原虫共感染小鼠外周血红细胞疟原虫的感染率，减轻的肝脏、脑和肺脏的病理损伤。<br>　　2.慢性旋毛虫共感染可以一定程度上增加伯氏疟原虫共感染小鼠肝脏中枯否氏细胞的数量。推测旋毛虫慢性感染可能通过调节细胞免疫来减轻伯氏疟原虫共感染小鼠的肝脏病理损伤。<br>　　3.慢性旋毛虫感染可降低伯氏疟原虫共感染小鼠脾脏组织的TLR2、TLR3、TLR6和NF-κB的表达水平，从而发挥免疫调节作用。<br>　　4.慢性旋毛虫感染可增加伯氏疟原虫共感染小鼠血清中抗旋毛虫感染的抗体水平。