换一批
换一批摘要目的:通过生物信息技术预测分析Omp2b蛋白的优势B细胞表位和T细胞表位，筛选T-B联合抗原表位，探讨其免疫原性和激发免疫应答的特点，为开发有效的布鲁氏菌疫苗奠定基础。方法:1)利用生物信息学软件ProtParam，SOMPA，SWISS-MODEL，Rasmol，DNAStar，SYFPEITHI和IEDB来分析Omp2b蛋白的结构，预测T细胞和B细胞的优势表位以及T-B联合表位;2)ELISPOT法检测细胞中IFN-γ阳性细胞数;3)ELISA检测布鲁氏菌病患者血清中针对Omp2b蛋白的T-B联合肽的特异性IgG抗体水平以及IL-2、IL-4、IL-10等细胞因子水平。体外培养免疫细胞，检测上清液中的穿孔素和颗粒酶B。结果:1)生物信息软件综合分析Omp2b蛋白有7个CTL细胞表位(76-84，102-110，231-239，241-249，290-298，329-337，335-343)、3个Th细胞表位(133-147，178-192，202-216)和8个B细胞优势表位(66-85，115-131，169-176，184-188，196-212，268-286，306-316，328-352)，并筛选出了1个T-B细胞联合抗原表位的潜在区段196-216;2)患者组中分泌IFN-γ细胞数(SFU)较健康对照组显著增高(P＜0.01);3)布鲁氏菌病患者血清中的IgG抗体、细胞因子IL-2、IL-4、IL-10水平、穿孔素和颗粒酶B的浓度也显着增加(P＜0.01)。结论:Omp2b具有7个CTL表位、3个Th表位和8个B表位，其中T-B联合抗原表位可以产生特异性的体液免疫应答和细胞免疫应答，为了布鲁氏菌表位疫苗的筛选与构建提供参考。
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