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摘要目的:N6甲基腺苷(m6A)修饰是mRNA内部丰度最高的修饰，其动态修饰过程和生物学功能由甲基转移酶(writer)、去甲基酶(eraser)和识别蛋白(reader)共同调控。FTO(Fatmassandobesity-associatedprotein)是m6A修饰的主要去甲基酶，具有促进肿瘤发生发展的功能，且己有多种研发成功的小分子抑制剂。然而，FTO在急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞中的表达、功能及作用机制尚无文献报道。<br>　　本论文旨在研究FTO在T-ALL细胞中的表达和功能、解析FTO的作用机制，并评价FTO小分子抑制剂的抗T-ALL效能。<br>　　方法:<br>　　(1)通过RT-qPCR检测FTO在T-ALL细胞与正常对照细胞中的表达;在TALL细胞中沉默和过表达FTO，并检测细胞的m6A修饰水平、生长和集落生成等;检测沉默FTO对细胞凋亡及Jurkat细胞在免疫缺陷(NSG)小鼠中诱发白血病的能力;检测沉默FTO对T-ALL患者来源细胞和正常造血细胞增殖的影响。<br>　　(2)RNA-seq筛选T-ALL细胞中受FTO表达影响的差异表达基因，并使用RTqPCR验证;通过放线菌素D(ActD)和RNA甲基化免疫共沉淀(methylatedRNAimmunoprecipitation，MeRIP)等实验筛选FTO的下游靶基因;在单独沉默RAB7A(RAS-relatedGTP-bindingproteins)后，检测细胞生长、集落生成和细胞凋亡等;在沉默FTO细胞中过表达RAB7A，通过RNA免疫共沉淀(RNAimmunoprecitation，RIP)研究YTHDF2(YTHdomainfamily2，m6A识别蛋白)与RAB7AmRNA之间的相互作用;使用精胺普鲁兰递送的方法，在沉默FTO的细胞中沉默YTHDF2，检测细胞的生长、集落生成和RAB7A表达等。<br>　　(3)检测FTO的抑制剂(FB23-2)对T-ALL细胞的活性、集落生成、细胞凋亡和白血病生成能力的影响;并检测FB23-2对T-ALL患者来源细胞和正常造血细胞增殖的影响。<br>　　结果:<br>　　(1)FTO在T-ALL细胞较正常造血细胞中异常高表达;FTO调控T-ALL细胞的m6A修饰水平，FTO促进T-ALL细胞的体外生长及集落生成能力;沉默FTO促进细胞凋亡、显著减弱Jurkat细胞在NSG小鼠中的成白血病能力<br>　　(2)RNA-seq和验证显示FTO在转录后水平调控RAB7A的表达，沉默FTO增强RAB7AmRNA上的m6A修饰;沉默RAB7A显著抑制T-ALL细胞的生长和集落生成能力，并诱发细胞凋亡;过表达RAB7A能部分“挽救”沉默FTO导致的生长抑制和凋亡增高;YTHDF2能在沉默FTO细胞中较对照细胞更强地结合RAB7AmRNA，沉默YTHDF2部分“挽救”沉默FTO导致的生长抑制与RAB7A表达受抑。<br>　　(3)FB23.2有效抑制T-ALL细胞的活性，集落生成能力，并诱发凋亡，但对正常造血细胞影响较小;FB23-2也显著减弱Jurkat细胞的白血病生成能力。<br>　　结论:FTO在T-ALL细胞中异常高表达，通过抑制RAB7A的m6A/YTHDF2依赖性降解而稳定其表达;FTD/m6A/RAB7A通路促进T-ALL细胞的生长与生存;FTO的小分子抑制剂具有一定的抗T-ALL效能。