检索历史 清除

摘要先天畸形、肿瘤、外伤等原因导致的软骨缺损是常见的临床疾病。由于软骨组织结构致密、组织内部无血管组织及软骨细胞密度较低等特点，软骨组织的愈合能力极其有限。传统的治疗方法包括自体软骨移植、自体软骨细胞移植、同种异体软骨移植和微骨折等，均存在一定缺点而使其临床应用受到限制。<br>　　近年来，组织工程快速发展，有望成为治疗软骨缺损的有效手段。软骨脱细胞基质(Acellular Cartilage Matrix，ACM)通过将动物或人的软骨组织进行脱细胞后获得。作为一种在生物活性物质和空间结构上的双重仿生材料，ACM能够模拟天然软骨细胞外环境，为细胞的附着、增殖和营养成分的交换提供了足够的空间。同时，ACM具有良好组织相容性、低细胞毒性并具备一定机械力学性能。这使得软骨脱细胞基质成为理想的软骨组织工程材料，在修复软骨缺损上具有独特的优势。<br>　　然而，由于软骨组织结构致密，脱细胞试剂在组织中扩散效率低，需要增加脱细胞试剂的作用时间和浓度来提高提高脱细胞程度，但脱细胞后的软骨组织机力学能会明显下降。且已有研究表明，改变ACM浓度能够改变支架孔隙率和孔径大小。因此，需要进一步研究来优化ACM支架的浓度和制备方案，探究ACM浓度对构建ACM支架在机械强度、孔径大小、孔隙率等方面的影响，为其构建组织工程软骨提供实验基础和参考。<br>　　目的:<br>　　比较不同浓度的ACM对构建三维多孔支架的物理性能的影响;筛选出适合用于构建组织工程软骨的实验方案。<br>　　材料与方法:<br>　　1、材料无骨关节病变的牛膝关节2个。<br>　　2、方法1）牛膝关节软骨的取材、冷冻、粉碎，获得软骨微粒。2）对软骨微粒进行胰酶消化、核酸酶消化、洗涤、清洗，获得牛关节软骨来源的ACM。3)以不同浓度ACM构建三维多孔支架:A组(100％)、B组(60％)、C组(30％)。4)对获得的支架材料进行大体观察、组织学评估、DNA定量检测、微观结构观察及测量、力学性能检测。5）对测量结果进行统计分析。<br>　　结果:<br>　　1)组织学观察各组ACM支架中未见明显细胞形态，无细胞碎片残留。HE染色、天狼星红染色显示均为红染，表明胶原成分得到一定程度保留。2)DNA定量检测显示残余DNA浓度为1.103±0.174ng/mg，表明获得的ACM脱细胞彻底。3)扫描电镜结果显示A、B、C三组支架随着ACM浓度的增加，孔径明显减小，各组间差异明显。4）物理参数:A、B、C各组支架密度、屈服极限、杨氏模量与ACM浓度呈正相关;吸水率、孔隙率与ACM浓度呈负相关。<br>　　结论:<br>　　以浓度为100％和60％的ACM构建的三维多孔支架具有良好的吸水率、孔隙率、孔径和接近正常软骨组织的力学性能，可作为选择方案用于构建组织工程软骨。