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摘要本文主要从以下几个部分展开论述：<br>　　第一部分：<br>　　背景和目的:肝细胞癌是最常见的消化道肿瘤之一，其致死率在全球排第四名。由于HCC患者的肝脏功能通常受损，药物治疗会对患者肝脏造成二次伤害;因此找到合适的体外模型来保证患者获得更好的治疗效果以及减少不必要的化疗暴露是十分必要的。近年来3D生物打印技术发展迅速，大量实验证实3D生物打印技术能够成功建立体外肿瘤药筛模型。在这里，本研究利用3D生物打印技术，构建肝癌患者来源的肝细胞癌与多种间质细胞共同存在的更加贴合体内真实环境的肝细胞癌体外模型。<br>　　方法:本研究收集了4例肝细胞癌患者手术后切除的组织标本。通过组织消化获得肝癌细胞悬液，以3D生物打印机作为平台，利用GelMA作为生物基质，将人原代肝癌细胞与多种间质细胞打印为预先设计好的同心圆模型，并对细胞在打印体中的生长、存活能力进行评价。AFP/CD68、CD68/CD163、AFP/CD31、AFP/αSMA对打印体的免疫荧光染色有助于对各个细胞组分进行免疫表型定位，以明确肝癌细胞及间质细胞在3D肝癌模型中的存活、增殖能力，以及肝癌细胞与间质细胞的分布关系。<br>　　结果:本研究成功构建体外肝细胞癌肿瘤微环境模型。肿瘤细胞和间质细胞同预期一样在同心圆内圈及外圈分布并呈现散在的球形成团分布，打印体内细胞的存活和生长基本稳定。<br>　　结论:本研究成功建立了体外肝细胞癌体外微环境模型，并验证了多细胞组分在打印体内的存活和增殖能力。未来还需要进行更多的实验，如全外显子测序、RNA测序、免疫组化染色以及裸鼠成瘤实验来验证模型是否能够保留亲代肝癌组织的特征。<br>　　第二部分：<br>　　背景和目的:常染色体显性多囊性肝病(Autosomal dominant polycystic liver disease，ADPLD)是一种罕见的遗传病，发病率为1/100，000。虽然多发的肝囊肿并不会影响大部分患者的生活质量，但对于少数囊肿巨大的患者来说，频繁的腹胀、早饱，以及可能出现的门脉高压等并发症，给他们的生活造成了巨大的负担。基因治疗为这类患者提供了新的治疗方向，但该治疗的开展依赖于对ADPLD致病基因更加深入的了解。<br>　　方法:本研究收集了18例独立ADPLD样本，并对所有样本进行全外显子测序，利用人类基因突变数据库（HGMD）专业版对测序数据进行过滤，寻找可能存在的新的致病基因。<br>　　结果:在18例ADPLD样本中，研究者发现2例PRKCSH突变，2例PKD2突变，1例PKHD1/PKD1共同突变，1例PKHD1突变、1例PKD1突变以及1例GANAB突变，其中PRKCSH和SEC63的突变频率远低于欧洲和美国人群。同时研究者发现一个新的PKHD1错义突变位点。<br>　　结论:本研究发现例一个新的PKHD1错义突变，并提出中国人群中ADPLD的遗传特征与欧洲和美国人群不同，提示未来有必要对中国人群的ADPLD相关致病基因进行更多研究。