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摘要肝纤维化是肝硬化和肝癌共同的前期病理过程，在人群中的发病相当普遍，因此在临床上具有重要意义。SOX9作为SRY(sexdeterminationregionofYchromosome)相关的高度保守HMG盒转录调控因子，不仅在发育过程中起关键作用，而且在肝纤维化过程中可以激活沉默的肝星状细胞转变为肌成纤维细胞分泌细胞外基质，从而打破了正常的胶原合成与降解的动态平衡，使得胶原沉积，促进了肝纤维化的发展。lncRNA(longnon-codingRNA)的功能涉及细胞生物学的各个方面，目前已知lncRNA的表达变化与各种疾病的发生密切相关，并且有显著的组织和细胞特异性，而lncRNA在肝纤维化或肝硬化发生过程中的作用机制仍然不完全清楚。有文献报道在BDL纤维化模型中，肝组织中lncRNA-H19表达含量升高。作为最早发现的众多lncRNA中的一个，lncRNA-H19迄今为止已经在许多疾病中有报道，但其在肝纤维化中的作用机制还不完全很清楚。<br>　　我们从小鼠肝纤维化动物模型中分离出肝组织和肝细胞，通过qRT-PCR实验发现纤维化肝组织和肝细胞中SOX9的表达明显上调。为了探究下调肝脏SOX9表达是否会对肝纤维化产生影响，我们经尾静脉注射SOX9的反义寡核苷酸(ASO)来降低小鼠肝脏SOX9的表达，发现其可以显著抑制CCl4诱导的小鼠肝纤维化以及肝脏炎症反应。生物信息学软件分析表明SOX9可以和lncRNA-H19的启动子区域结合从而促进其在肝细胞中的表达。为了验证这一分析结果，我们向肝细胞中转染了过表达SOX9的质粒PCI-SOX9，结果表明瞬时过表达SOX9促进了lncRNA-H19表达量的上调。除此之外我们还构建了过表达SOX9的稳转系细胞来检测lncRNA-H19的表达量，发现类似的结果。进一步克隆H19的启动子区域，构建荧光素酶报告载体，Luciferase实验结果表明SOX9确实可以和lncRNA-H19启动子区域结合并促进其表达。随后我们检测了小鼠肝纤维化动物模型中肝组织和肝细胞中的lncRNA-H19含量，发现纤维化肝组织和肝细胞中lncRNA-H19的表达量都发生了明显的上调，表明肝细胞lncRNA-H19的表达变化可能与纤维化过程有关。为了探究下调肝脏lncRNA-H19表达是否会对肝纤维化产生影响，我们经尾静脉注射lncRNA-H19的反义寡核苷酸(ASO)来降低小鼠肝脏lncRNA-H19的表达，发现其可以显著抑制CCl4诱导的小鼠肝纤维化以及肝脏炎症反应。<br>　　肝细胞损伤是肝纤维化发生的根本原因，我们发现在阿霉素及H2O2诱导的小鼠肝细胞损伤中SOX9和lncRNA-H19的表达显著升高，KnockdownlncR-NA-H19能显著降低H2O2诱导肝细胞细胞的坏死比例。我们还发现lncRNA-H19与肝细胞增殖速度有关，过表达lncRNA-H19能有效抑制细胞增殖。最后为了在动物水平验证SOX9调控肝纤维化的作用是否依赖于lncRNA-H19的表达，我们在小鼠肝脏过表达lncRNA-H19，而后分析SOX9ASO对CCl4诱导的小鼠肝纤维化的作用。实验结果表明肝细胞过表达lncRNA-H19后，KnockdownSOX9并没有抑制肝纤维化的发生，说明SOX9调控肝纤维化的作用依赖于lncRNA-H19的表达。最后我们对稳定过表达lncRNA-H19的AML12肝细胞系做了生物信息学分析，结果表明在肝细胞内稳定过表达lncRNA-H19之后的确有许多和生物过程、细胞成分、分子功能有关的基因发生了上调和下调。综上所述，本文的研究结果阐明了在肝纤维化过程中，肝细胞中的SOX9可以结合lncRNA-H19的启动子区域并促进其在肝细胞中的表达，同时lncRNA-H19通过抑制细胞增殖和促进细胞凋亡坏死的方式在肝纤维化中起作用。