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密生波罗花抗氧化活性及抗炎作用的研究

摘要密生波罗花(ncarvilleacompacta)为紫葳科角蒿属植物,主要产于西藏、青海、四川等省,为常用藏药,其根、花、种子均可入药,具有平肝潜阳、清热除湿的功效,当地医生用于治疗黄疸、消化不良等。本文系统研究了密生波罗花的化学成分及其抗氧化活性,为密生波罗花作为天然抗氧化剂的开发利用提供了基础数据;并通过LPS诱导RAW264.7巨噬细胞建立抗炎模型,研究了密生波罗花抗炎的作用,为更好的开发其药用价值提供了科学依据。<br>  论文主要有以下三个部分组成:<br>  (1)采用国标方法测定密生波罗花中基础化学成分总糖为1.77%、粗脂肪为5.30%、粗蛋白14.36%、粗纤维66.01%、灰分为2.3%、水分为4.88%;实验中共检测出17种氨基酸,其中必需氨基酸占总氨基酸含量的39%,药用氨基酸占总含量的72%,鲜味氨基酸占总氨基酸的32%;通过对密生波罗花中乙醇提取物和水提取物的DPPH自由基的清除能力、Fe3+还原能力以及MPP+诱导PC12细胞氧自由基修复能力的测定,结果表明:密生波罗花中营养物质丰富,氨基酸种类繁多且有较好的抗氧化活性,可作为天然抗氧化剂开发利用。<br>  (2)以单因素试验为基础使用BOX-Behnken响应面法,建立密生波罗花物质提取量的回归方程,模型的拟合度。使用上述条件对密生波罗花黄酮的提取工艺进行优化,得到的参数为:乙醇浓度30.4%、提取时间3.5h、提取温度90℃、料液比1∶45(g/g)。重复试验,在最优工艺下获得的实际总黄酮提取量为27.97±0.814mg/g,与预测值无显著性差异。<br>  (3)采用细胞实验研究密生波罗花不同萃取物对LPS诱导RAW264.7细胞所产生的炎症因子NO的抑制率,从而确定密生波罗花最佳的抗炎活性部位,并通过RNA-Seq技术探讨密生波罗花对LPS作用于RAW264.7细胞所产生炎症的作用机制,并通过对基因功能的注释和KEGG通路的富集,从而获得与炎症反应相关的基因和信号通路,为密生波罗花相关功能基因和抗炎机制的进一步研究提供了科学的依据。

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