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摘要第一部分NK细胞在慢性淋巴细胞白血病中的临床意义<br>　　目的:自然杀伤(NK)细胞是一种天然免疫细胞，在机体抗肿瘤和抗病毒中发挥着至关重要的作用。本研究旨在探讨外周血NK细胞绝对值在慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者中的分布、与临床指标的相关性、动态变化及其临床意义。<br>　　方法:回顾性分析2004年3月至2015年10月收治的273例初诊CLL患者的T细胞亚群等临床资料。Mann-WhitneyU检验及Kruskal-Wallis检验分析NK细胞绝对值与其他临床指标的相关性。生存分析采用Kaplan-Meier法，预后因素分析采用Cox比例风险模型。<br>　　结果:273例初诊CLL患者外周血NK细胞绝对值的中位值为0.63×109/L（0.01～5.83×109/L）。使用X-tile软件获得NK细胞预测CLL预后的最佳分界值为0.40×109/L，以此分界值将患者分为两组，其中低NK细胞数（＜0.40×109/L）组较高NK细胞数（≥0.4×109/L）组患者生存期明显缩短，其5年总生存期(OS)分别为63.7％和79.2％(P=0.0014)。多因素生存分析发现NK细胞绝对值对CLL的OS(P=0.028)具有独立预后意义。相关性分析发现临床分期较早(BinetA期、B期)的患者(P=0.031)，ZAP-70阴性(＜20％)的患者(P＜0.001)，白蛋白（ALB）正常的患者(P=0.05)及β2-微球蛋白(β2-MG)正常的患者(P=0.03)有较高的NK细胞计数。我们观察了19例患者NK细胞数量在治疗及随访过程中的动态变化，发现6例患者在疾病发生进展时其NK细胞比例显著降低(P=0.004)，相反，8例治疗后获得疾病稳定的患者其NK细胞比例保持在一个较高的稳定水平(P=0.779)。以传统预后因素对患者进行亚组分析，发现NK细胞数量能够在此基础上进一步对患者进行危险分层。<br>　　结论:初诊CLL患者外周血NK细胞数量可能反应自身免疫水平，NK细胞数量高的患者预后较好。NK细胞数量的动态变化可以反映患者疾病状态，能更精确的预测患者预后及危险分层。NK细胞绝对计数有望成为一个新的相对独立的CLL患者生存预后指标。<br>　　第二部分:西达本肢体外刺激慢性淋巴细胞白血病患者NK细胞表面NKG2D表达的变化及其意义<br>　　目的:自然杀伤(NK)细胞是一种天然免疫细胞，在人体抗肿瘤中发挥重要作用。NK细胞的杀伤活性有赖于其表面活化性受体与靶细胞表面相应配体的相互作用而激活，其中NK细胞活化性受体凝集素样同型二聚体(NKG2D)对NK细胞激活发挥关键作用。体外实验发现，西达本胺能够上调NKG2D的表达，从而影响NK细胞活性。本研究利用西达本胺体外刺激慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者NK细胞，探究NKG2D表达水平的变化及其意义。<br>　　方法:无菌分离17例CLL患者外周血单个核细胞进行体外培养，设立不同浓度西达本胺处理的干预组和不含药物的对照组，经24h和48h培养后收集细胞。用流式细胞术(FCM)检测NKG2D的表达。应用SPSS(19.0windows版)进行数据分析，干预组和对照组细胞NKG2D表达水平比较使用Mann-WhimeyU检验，定义P＜0.05为差异有统计学意义。<br>　　结果:17例CLL患者中，男性13例，女性4例，中位年龄64岁（35～75岁），Binet分期A期4例，B期4例，C期9例。7例患者样本有IGHV基因突变，2例患者样本有p53基因突变，4例患者有p53基因缺失。FCM分析发现CLL患者NKG2D受体表达远低于健康对照者(MFI:280.4±20.60vs.399.1±22.88，P=0.003;表达百分率:2.33±1.75vs.4.16±1.74，P=0.013)。以不同浓度的西达本胺处理CLL患者单个核细胞24h和48h，发现西达本胺能够以时间及剂量依赖性上调NKG2D的表达，并且西达本胺引起NKG2D表达的上调与性别、年龄、Binet分期、IGHV基因突变及p53基因异常之间无相关性（P＞0.05）。<br>　　结论:CLL患者NK细胞表面NKG2D受体表达下降，西达本胺能够上调CLL患者NK细胞表面NKG2D受体的表达，增加NK细胞杀伤活性。