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摘要研究背景<br>　　足细胞损伤是出现蛋白尿的重要原因，也是多种慢性肾脏病的共同发病机制。足细胞骨架蛋白synaptopodin是一种与肌动蛋白微丝紧密相连的富含脯氨酸的线状蛋白质，是足细胞分化成熟的标志。synaptopodin的突变或缺失可以导致足细胞结构的改变，引起蛋白尿和肾小球硬化的发生。但目前对于synaptopodin的调控机制仍然不是很清楚。Sos2是鸟苷酸交换因子Sos(SonofSevenless)的一种亚型，研究表明Sos2与EPS8、E3b1形成的复合物对细胞骨架蛋白具有调控作用。然而，Sos2在足细胞中的表达及效应尚无报道。本研究拟探讨Sos2在足细胞中的表达及效应，并进一步探究其机制是否与调控足细胞骨架蛋白synaptopodin有关。<br>　　方法<br>　　(1)利用全基因组二代测序检测发现某家族性肾脏病患者Sos2基因发生纯合突变，通过免疫荧光染色证实纯合突变基因的表达情况;(2)通过免疫荧光染色观察Sos2在不同类型的肾小球疾病患者的足细胞的表达情况;(3)体外培养的足细胞，分别给予Ionomycin(2μM)处理24h、ADR(0.25μg/ml)处理24h、LPS（100μg/ml）处理48h，通过实时荧光定量PCR、westernblot以及免疫荧光染色检测Sos2的表达;(4)沉默足细胞中的Sos2，通过实时荧光定量PCR及westernblot验证Sos2-siRNA的沉默效率，通过westernblot及免疫荧光染色检测足细胞的骨架蛋白synaptopodin、F-actin的表达;(5)过表达足细胞中的Sos2，通过实时荧光定量PCR及westernblot验证Sos2腺病毒过表达的效率，通过westernblot及免疫荧光染色检测synaptopodin、F-actin的表达;(6)调控足细胞中Sos2的表达，通过实时荧光定量PCR检测synaptopodin的mRNA的表达情况，通过westernblot检测synaptopodin的降解情况;(7)通过免疫荧光染色检测正常小鼠肾组织中Sos2的表达情况，通过免疫共沉淀实验检测正常小鼠肾皮质、正常足细胞与ADR(0.25μg/ml)处理24h的足细胞、共同转染Flag-Sos2与HA-synaptopodin的HEK-293细胞，Sos2与synaptopodin的相互作用情况。<br>　　结果<br>　　(1)与正常肾组织相比，在Sos2基因纯合突变的某家族性肾病患者的肾小球Sos2表达明显减少;(2)与正常肾组织相比，MCD、FSGS、MN患者肾小球足细胞的Sos2表达明显减少;(3)足细胞在Ionomycin、ADR、LPS刺激后，Sos2在mRNA及蛋白水平表达均明显降低;(4)沉默Sos2，足细胞的骨架蛋白synaptopodin表达减少，F-actin骨架紊乱;(5)过表达Sos2延缓了ADR损伤刺激引起的骨架蛋白synaptopodin表达减少，F-actin骨架紊乱;(6)沉默或者过表达Sos2，足细胞synaptopodin在mRNA水平无明显变化;沉默Sos2，synaptopodin的降解增加，过表达Sos2延缓了ADR引起的synaptopodin的降解(7)Co-IP结果显示:在正常小鼠肾皮质、正常足细胞、共同转染Flag-Sos2与HA-synaptopodin的HEK-293细胞，Sos2与synaptopodin存在直接结合，在ADR刺激后结合减少。<br>　　结论<br>　　Sos2通过直接和synaptopodin结合，稳定synaptopodin不被降解保护足细胞。