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摘要研究背景:<br>　　胃癌(GC)是世界上最常见的恶性肿瘤之一，由于早期诊断困难，并且缺少有效的靶向药物，导致胃癌患者预后不良，死亡率高。因此，探讨胃癌发生发展的分子机制，寻找有效的肿瘤早期诊断标志物和治疗靶点具有重要意义。假磷酸酶STYX是蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPs)家族的一员，与多种生物功能和疾病相关，如精子发生、神经突起生长和癌症。<br>　　本论文中，我们研究了STYX在胃癌组织中的表达及其对胃癌发生发展的影响，并进一步探索STYX在胃癌细胞中发挥作用的调控机制，评估其作为胃癌早期诊断与治疗靶点的潜在价值。<br>　　实验方法:<br>　　1.利用TCGA、GEO数据库分析STYXmRNA在胃癌及癌旁组织中的表达情况;收集胃癌患者组织标本，提取蛋白质，利用WesternBlot检测STYX在胃癌及癌旁组织中的表达，并进行灰度分析进行统计学检验。利用GSEA软件、Kaplan-Meier(KM)plotter数据库分析STYX与胃癌进展及生存期之间的相关性。<br>　　2.构建STYX过表达质粒，合成STYX小干扰RNA(siRNA)，利用EdU、CCK-8、Transwell实验检测STYX过表达或干扰对胃癌细胞生物学功能的影响。<br>　　3.利用裸鼠皮下荷瘤实验及尾静脉注射实验检测STYX在体内的生物学功能。<br>　　4.运用Co-IP与WestemBlot等实验探索STYX发挥生物学功能的分子机制，并运用EdU、CCK-8实验、Transwell实验进行生物学功能的回复实验，以验证STYX发挥功能的机制。<br>　　5.利用qRT-PCR及WesternBlot检测幽门螺旋杆菌感染对细胞中STYX表达水平的影响及相关通路。<br>　　实验结果:<br>　　1.STYX在胃癌组织中的表达水平<br>　　TCGA、GEO数据库分析均发现:与癌旁组织相比，STYXmRNA在胃癌组织中表达显著升高;收集的胃癌及癌旁组织进行WestemBlot检测，证实STYX蛋白在胃癌组织中显著高表达。GSEA分析发现STYX与细胞周期、EMT及肿瘤相关基因表达呈正相关，KMplotter分析发现STYX表达水平与胃癌患者的生存期呈负相关。<br>　　2.STYX在胃癌中的生物学功能研究<br>　　体内外实验均证实:STYX过表达可显著促进胃癌细胞的增殖和转移，敲低STYX则具有相反的作用。<br>　　3.STYX发挥其生物学功能的分子机制<br>　　我们发现STYX蛋白可与E3泛素连接酶底物结合蛋白FBX031相互作用，从而降低FBX031与其底物CyclinD1、Snail1等的结合，抑制FBX031对其底物蛋白的泛素化降解，进而增加CyclinD1和Snail1在胃癌细胞中的积累。<br>　　4.STYX通过FBX031促进胃癌细胞的增殖和转移<br>　　利用回复实验证明:在STYX过表达的细胞中同时过表达FBX031时，STYX介导的对胃癌细胞增殖和转移的促进作用可被FBX031的高表达逆转。<br>　　5.幽门螺旋杆菌对STYX表达的调控机制<br>　　转录因子c-Jun可促进胃癌细胞中STYX的表达，幽门螺旋杆菌感染胃癌细胞后可通过调节c-Jun来促进STYX表达。<br>　　实验结论:<br>　　STYX在胃癌组织中异常高表达，且体外与体内实验皆表明STYX高表达可显著促进胃癌细胞的增殖与转移;机制上，STYX通过与FBX031相互作用抑制FBX031的功能，间接影响FBX031下游靶蛋白CyclinD1与Snail1的表达水平，并且STYX的功能可被FBX031回复;此外，幽门螺旋杆菌可以通过c-Jun促进STYX的表达。本研究揭示了STYX在胃癌发生发展中的作用及机制，提示STYX可能作为胃癌早期诊断的潜在标志物和治疗靶点。