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摘要目的:<br>　　对桦褐孔菌抗肿瘤有效部位三萜类成分进行最佳提取工艺、纯化工艺及胶囊制剂成型工艺和质量标准研究，对得到的桦褐孔菌总三萜胶囊进行初步药效学研究，为桦褐孔菌相关制剂的开发奠定基础。<br>　　方法:<br>　　1、通过显色法，建立桦褐孔菌总三萜类有效部位的测定方法。以总三萜提取率为指标，通过单因素考察和L9(34)正交实验，确定桦褐孔菌三萜类成分的最佳提取工艺。<br>　　2、通过大孔树脂吸附实验对桦褐孔菌总三萜粗提物进行纯化，分别进行静态、动态吸附行为考察和洗脱条件考察，确定桦褐孔菌总三萜的最佳纯化工艺。<br>　　3、通过对药粉、辅料、药辅比、胶囊内容物性能以及胶囊用量5个方面进行考察，确定桦褐孔菌总三萜胶囊的最佳制剂工艺。<br>　　4、通过薄层鉴别、含量测定、水分、装量差异、崩解时限等方面建立桦褐孔菌总三萜胶囊的质量标准草案。<br>　　5、桦褐孔菌总三萜胶囊体内外抗肿瘤药效学研究:体外进行细胞增殖、划痕实验，观察药物的抗肿瘤增殖及迁移作用，流式细胞仪和AO/EB法检测肿瘤细胞凋亡情况;体内实验，无菌环境下将肿瘤细胞接种到裸鼠右侧腋下，建立Hela裸鼠荷瘤模型，从荷瘤小鼠体重、瘤重及抑瘤率、脾指数、肿瘤组织切片、免疫相关因子变化等方面，采用HE染色，Elisa法，蛋白免疫印迹(WesternBlot)法进行检测，从免疫和凋亡等方面对桦褐孔菌总三萜胶囊的抗肿瘤作用机制进行初步探究。<br>　　结果:<br>　　1、优化的桦褐孔菌总三萜的最佳提取工艺为12倍量95％乙醇，提取80min，共提取2次，得总三萜提取率为2.136±0.019％。<br>　　2、优化的桦褐孔菌总三萜的最佳纯化工艺为选用AB-8型大孔吸附树脂，药液保留原pH值，上样药液浓度选用粗提物2.0mg/mL，体积为7BV，体积流量为1mL/min，洗脱时先用50％乙醇除杂、再用95％乙醇8BV洗脱、洗脱体积流量为3mL/min，纯化后总三萜含量为73.39±0.773％。<br>　　3、优化的桦褐孔菌总三萜胶囊的成型工艺为选取乳糖作为辅料，药辅比为5∶1，装3号空胶囊，制备胶囊。<br>　　4、制备3批桦褐孔菌总三萜胶囊，薄层色谱鉴别结果表明每批均可以显出桦褐孔菌醇、白桦脂醇的荧光点;含量测定结果表明桦褐孔菌总三萜的含量为612.50±6.63mg/g，桦褐孔菌醇的含量为97.82±1.30mg/g，白桦脂醇的平均含量为22.32±0.29mg/g;水分、装量差异、崩解时限均符合《中国药典》四部胶囊剂的规定。<br>　　5、桦褐孔菌总三萜胶囊体外对Hela细胞的IC50值为184.20μg/mL，能够有效抑制Hela细胞的增殖;划痕实验证明桦褐孔菌总三萜可抑制Hela细胞的迁移;流式细胞术和AO/EB法表明桦褐孔菌胶囊主要诱导Hela细胞的晚期凋亡。<br>　　体内抗肿瘤作用表明桦褐孔菌总三萜胶囊可明显降低Hela裸鼠肿瘤的瘤重;降低脾异常增大，抑制脾脏的负免疫调节，促进正免疫调节，从而抑制Hela裸鼠肿瘤的生长;可显著提高肿瘤小鼠血清中IL-2、IFN-γ的水平;可诱导肿瘤组织出现坏死情况;可抑制PI3K/AKT通路的活化、增强促凋亡蛋白BAX的表达。<br>　　结论:<br>　　1、优化的桦褐孔菌总三萜提取、纯化及成型工艺稳定可靠。<br>　　2、制定了桦褐孔菌总三萜胶囊质量标准草案，为桦褐孔菌相关制剂的开发奠定实验基础。<br>　　3、桦褐孔菌总三萜胶囊可通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、提高宿主免疫功能，从而抑制肿瘤的生长。