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摘要一、研究目的<br>　　1.研究山奈酚对胶质瘤U87细胞增殖、侵袭迁移及血管形成的作用。<br>　　2.研究BTN3A2在山奈酚抑制胶质瘤U87细胞血管形成中的作用机制。<br>　　二、研究方法<br>　　1.体外培养人胶质瘤U87细胞，分为二组:对照组:U87细胞加入等量的含0.1％DMSO的完全培养基;实验组:U87细胞加入山奈酚80ug/mL。①MTT法检测山奈酚对U87细胞增殖的影响;②Transwell小室检测山奈酚对U87细胞侵袭和迁移的作用;③管腔形成实验检测山奈酚对胶质瘤U87细胞血管形成的影响;④WB检测相关蛋白VEGF、IkB-α、p-IkB-α、P-P65的表达;⑤qPCR法检测山奈酚对U87细胞BTN3A2基因表达的影响;⑥WB检测山奈酚对U87细胞BTN3A2蛋白的影响。<br>　　2.构建过表达BTN3A2的胶质瘤U87细胞，验证山奈酚通过靶向BTN3A2抑制胶质瘤U87细胞血管形成。分为二组:对照组:U87细胞加入浓度为80ug/mL山奈酚溶液10ml;实验组:U87细胞加入浓度为80ug/mL山奈酚溶液后转染扩增BTN3A2基因。①qPCR法检测两组BTN3A2基因的变化;②管腔形成实验检测两组血管形成的变化;③WB检测两组相关蛋白VEGF、IkB-α、p-IkB-α、P-P65表达的变化。<br>　　三、研究结果<br>　　1.胶质瘤U87细胞经过山奈酚处理后，其增殖能力受到抑制，侵袭和迁移数量减少，血管形成数显著减少，BTN3A2基因表达降低，血管生成相关蛋白及NF-κB信号通路相关蛋白的表达明显被抑制，与空白对照组相比具有明显的统计学差异。①山奈酚抑制胶质瘤U87细胞的增殖:培养24h、48h、72h后，与对照组相比，实验组U87细胞存活率为72.22％、60.64％、48.36％，差异具有显著统计学意义（均P＜0.001）;②培养24h、48h、72h后，实验组U87细胞侵袭、迁移较对照组较少，差异具有显著统计学意义（均P＜0.001）;③培养24h、48h、72h后，实验组U87细胞血管生成数量均减少（均P＜0.001），表明山奈酚抑制胶质瘤U87细胞的血管形成;④实验组VEGF的蛋白表达显著减少(P＜0.005);实验组IKB-α的蛋白表达显著增加(P＜0.005)，P-IKB-α的蛋白表达显著减少(P＜0.005)，P-P65的蛋白表达显著减少(P＜0.005);⑤与对照组相比，实验组的BTN3A2的mRNA的表达显著降低(P＜0.005);⑥与对照组相比，实验组的BTN3A2的蛋白表达显著减少(P＜0.005)。随着山奈酚作用时间的延长，以上结果均呈明显的时间依赖性。<br>　　2.过表达BTN3A2后的胶质瘤细胞，BTN3A2基因表达升高，血管形成数量增加，血管生成相关蛋白及NF-κB信号通路相关蛋白的表达显著升高。①实验组BTN3A2的mRNA的表达显著增加(P＜0.005);②与对照组相比，实验组的血管生成数量增加(P＜0.005);③VEGF的蛋白表达显著增加(P＜0.005)，P-IKB-α的蛋白表达显著增加(P＜0.005)、P-P65的蛋白表达显著增加(P＜0.005)。随着山奈酚作用时间的延长，以上结果均呈明显的时间依赖性。<br>　　四、研究结论<br>　　1.山奈酚能够抑制胶质瘤U87细胞的增殖，抑制其侵袭和迁移能力并抑制胶质瘤细胞血管形成。<br>　　2.山奈酚对胶质瘤血管形成的抑制作用是通过靶向抑制BTN3A2发挥作用。