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人参提取物改善特应性皮炎及其对肠道菌群的影响

摘要背景:特应性皮炎(Atopic dermatitis,AD)是最常见的过敏性炎症性皮肤疾病,由多种因素引起,包括易感基因、免疫因素及环境因素等。主要的临床症状为严重瘙痒、红肿等。屋尘螨(House dust mite,HDM)等过敏原激活先天免疫在AD的发病机制中起着重要作用。目前针对AD的治疗方案主要包括糖皮质激素类药物、抗组胺类药物、钙调磷酸酶抑制剂和生物制剂等,这些治疗方案伴随着昂贵或毒副作用显著的缺点。人参(Panax ginseng C.A.Mey.)是五加科多年生草本植物人参的根茎,具有广泛的药理活性,包括抗炎和抗肿瘤等作用。人参的主要活性成分为人参皂苷,而人参中含有的糖类、蛋白质、氨基酸、维生素以及多种微量元素等都是人体所需的成分,其中很多半乳糖和果聚糖类物质可以起到类益生元作用。它们可以使机体摄入的食物或药食同源性的物质中的功能性成分促进肠道有益菌的生长和有益代谢物的产生,这些微生物或其代谢物对宿主有直接的益处,如保护肠道免受病原体的侵害并保持肠道生态系统的平衡。<br>  目的:本研究旨在探究人参提取物改善特应性皮炎的作用,并探究人参提取物对特应性皮炎改善作用是否与肠道微生物有关。<br>  方法:1.采用BALB/c雌性小鼠,腹腔注射0.5mL/kg速眠新Ⅱ麻醉剂麻醉后用医用胶带粘去小鼠耳部绒毛,涂抹HDM,每周两次,第21天尾静脉采血测血清IgE水平验证AD模型小鼠是否建模成功。造模成功后把AD模型小鼠随机分为模型组(HDM,灌胃水)、处理组(HDM+GE,灌胃50mg/kg GE)、阳性对照组(HDM+Dexa,灌胃1mg/kg Dexa),灌胃每天一次直至第42天取材,并设置正常对照组(Con,不做AD诱导,灌胃水)。检测指标:1)观察小鼠耳部炎症严重程度、耳厚增长情况;2)苏木素-伊红(Hematoxylin eosin,HE)、甲苯胺蓝(Toluidine blue,TB)染色观察小鼠耳组织病理学变化;3)ELISA法检测血清IgE水平和IFN-γ、IL-4、IL-13、IL-31、IL-17A水平。2.使用TNF-α/IFN-γ激活HaCaT细胞建立细胞模型。观察指标:1)MTT法检测人参提取物的药物毒性;2)PCR法检测细胞中TNF-α、IL-6、CCL17表达水平。3.取材当天采集小鼠粪便样本,采用16S高通量测序,基于Illumina技术测序平台,利用双端测序(Paired-End)方法分析AD小鼠肠道菌群的组成结构。<br>  结果:在AD小鼠模型中,GE可抑制小鼠耳肿胀程度、表皮层和真皮层的增厚,减少嗜酸性粒细胞和肥大细胞的聚集,并下调AD小鼠血清IgE、IFN-γ、IL-4、IL-13、IL-31、IL-17A水平。在TNF-α/IFN-γ诱导的HaCaT细胞模型中,GE降低TNF-α、IL-6和CCL17表达水平。同时发现人参提取物改变了AD小鼠肠道菌群组成,增加毛螺菌属NK4A136group(Lachnospiraceae NK4A136group)和乳酸菌属(Lactobacillus),下调拟杆菌属(Bacteroides)和另枝菌属(Alistipes)等。<br>  结论:GE在体内模型中能显著改善HDM诱导的过敏性炎症,在体外模型中能显著抑制TNF-α/IFN-γ诱导的细胞模型的炎症因子及趋化因子表达,具有抗特应性皮炎作用,并且发现GE改善了AD小鼠的肠道菌群。

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