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摘要目的:<br>　　筛选萎缩性痤疮瘢痕组织与正常组织中差异表达的mRNA（differentially expressed mRNAs，DE-mRNA），对瘢痕疙瘩、增生性瘢痕及正常组织行TIF1γ免疫组化染色，分析TIF1γ在瘢痕的作用;研究TIF1γ通过SMAD4调控人皮肤成纤维细胞（human skin fibroblasts，HFF-1）转化生长因子β(transforming growth factor-β，TGF-β)/SMADs信号通路的机制。<br>　　方法:<br>　　1对萎缩性痤疮瘢痕组织及正常组织进行mRNA芯片分析，使用DESeq2软件找出DE-mRNA，通过基因集富集分析（gene set enrichment analysis，GSEA）-疾病本体(disease ontology，DO)分析寻找萎缩性痤疮瘢痕组织中DE-mRNA相关的疾病谱，通过基因本体(gene ontology，GO)分析寻找萎缩性痤疮瘢痕组织中DE-mRNA相关的生物过程，通过KEGG本体(KEGG ontology，KO)分析寻找萎缩性痤疮瘢痕组织中DE-mRNA相关的信号通路;用免疫组化染色评估TIF1γ在瘢痕疙瘩、增生性瘢痕及正常组织的表达;<br>　　2构建过表达TIF1γ、TIF1γ+SMAD4的HFF-1，经TGF-β刺激后，用反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR)检测Cyclin-D1、CITED1及Caspase-12的mRNA水平分别反映细胞的增殖、迁移及凋亡能力，用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8，CCK-8)增殖实验、Transwell细胞迁移实验、末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记(TdT-mediated dUTP nick-end labeling，TUNEL)细胞凋亡实验分别评估HFF-1的增殖、迁移及凋亡情况;<br>　　3用免疫共沉淀（co-immunoprecipitation，CO-IP）及免疫荧光共定位，检测在TGF-β刺激下HFF-1中TIF1γ和SMAD4的相互作用，用蛋白免疫印迹(Western Blot，WB)检测在TGF-β刺激下过表达或沉默TIF1γ对TβRⅡ的影响;<br>　　4构建过表达或沉默TIF1γ的HFF-1，用WB检测在TGF-β刺激下SMAD2/3与SMAD4的激活状态，并在核浆分离后检测SMAD2/3与SMAD4的亚细胞定位。通过泛素化IP检测在TGF-β刺激下过表达或沉默TIF1γ后SMAD4的泛素化。<br>　　结果:<br>　　1在萎缩性痤疮瘢痕组织中发现TIF1γ等DE-mRNA。在萎缩性痤疮瘢痕的形成中，TIF1γ等DE-mRNA可能在损伤修复、皮肤组织发育、炎症反应、免疫反应等生物过程发挥作用，同时TIF1γ等DE-mRNA可能在TGF-β信号通路、FcεRI信号通路、NK细胞介导的细胞毒等信号通路发挥作用;TIF1γ在瘢痕疙瘩和增生性瘢痕呈阳性表达，在正常组织呈强阳性表达;<br>　　2TGF-β可上调HFF-1中Cyclin-D1、CITED1的转录，下调Caspase-12的转录，相应地促进细胞的增殖和迁移，抑制细胞的凋亡。过表达TIF1γ可抑制TGF-β对HFF-1的生物学行为影响，下调Cyclin-D1、CITED1的转录，上调Caspase-12的转录，相应地抑制细胞的增殖和迁移，促进细胞的凋亡。过表达TIF1γ+SMAD4，可拮抗TIF1γ对TGF-β的抑制作用，拮抗TIF1γ对HFF-1的生物学行为影响，上调Cyclin-D1、CITED1的转录，下调Caspase-12的转录，相应地促进细胞的增殖和迁移，抑制细胞的凋亡;<br>　　3在HFF-1中，TIF1γ与SMAD4发生相互作用，且TGF-β促进TIF1γ与SMAD4的结合。TIF1γ不影响在TGF-β刺激下TβRⅡ的表达;<br>　　4在HFF-1中，过表达TIF1γ抑制SMAD4的激活，从而抑制SMAD2/3/4的核转位。沉默TIF1γ促进SMAD4的激活，从而促进SMAD2/3/4的核转位。泛素化IP显示，过表达TIF1γ促进SMAD4的泛素化，沉默TIF1γ抑制SMAD4的泛素化。<br>　　结论:<br>　　1TIF1γ可能通过TGF-β信号通路抑制瘢痕的形成;<br>　　2在HFF-1中，TIF1γ抑制TGF-β信号通路，SMAD4促进TGF-β信号通路，且SMAD4拮抗TIF1γ对HFF-1生物学行为影响;<br>　　3在HFF-1中，TIF1γ可能通过结合SMAD4抑制TGF-β/SMADs信号通路，抑制细胞的增殖及迁移，并促进其凋亡;TIF1γ不能作用于TβRⅡ介导非SMADs通路调控细胞的增殖、迁移及凋亡;<br>　　4在HFF-1中，TIF1γ可能通过SMAD4的泛素化，抑制SMAD2/3/4的核转位，从而抑制TGF-β/SMADs信号通路的靶基因转录，抑制细胞的增殖和迁移，促进细胞的凋亡。