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重组Amelogenin多肽TRAP促进早期釉质龋再矿化作用的晶体学分析

摘要目的<br>  本实验在前期研究基础上,从晶体学角度,分析再矿化前后晶体形态结构的改变,研究重组Amelogenin多肽TRAP促进早期釉质龋的再矿化作用,明确促进釉质再矿化的功能片段,为探明Amelogenin调节早期釉质龋再矿化机制提供理论依据。<br>  方法<br>  实验对象为因正畸拔出的48颗前磨牙,选取唇颊面制备成3mm*3mm*2mm大小釉质块,37℃下脱矿液中处理72小时,制备人工釉质龋,随机分为4组(12个/组):A组:阴性对照组(单纯再矿化液处理组);B组:阳性对照组(含有氟化钠再矿化液处理组);C组:实验组(含有100μg/ml重组Amelogenin多肽N端+C端再矿化液处理组);D组:实验组(含有100μg/ml重组Amelogenin多肽TRAP再矿化液处理组)。每组人工釉质龋样本分别在四组再矿化溶液中处理12天,每24h更换一次再矿化溶液。再矿化后,取病损体部的釉质样品使用陶瓷研钵研磨成直径小于1μm的粉末,溶解于乙醇中,使用高分辨率透射电子显微镜(HRTEM)、选区电子衍射(SAED)对各组再矿化前后晶体形态结构进行分析。<br>  结果<br>  脱矿后经再矿化溶液处理后,在病损体部均可发现有晶体形成;阴性对照组和阳性对照组病损体部的晶体形态不规则,晶格条纹紊乱,含有多种晶相(OCP、HAP、FAP);实验组中形成的晶体边缘圆钝、规整,晶体内部密度均匀,未见有晶格明显缺陷。晶粒取向性佳,呈周期性排列。相比实验组C,实验组D晶体形貌图中没有表现出明显的六边形生长趋势。<br>  结论<br>  1、重组Amelogenin多肽TRAP和重组Amelogenin(N端+C端)多肽均具有一定的再矿化作用,和同期通过Micro-CT测量矿物质密度的实验结果一致。<br>  2、重组Amelogenin多肽TRAP和重组Amelogenin(N端+C端)多肽形成的晶体形态结构,相比于氟化物形成的FAP,更接近于天然釉质晶体。<br>  3、重组Amelogenin多肽TRAP相比重组Amelogenin(N端+c端)多肽取向性有所降低,但仍能形成与天然釉质晶体结构一样的羟基磷灰石晶体。

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