摘要本论文由三章构成,第一章为引言,介绍了皱叶酸模(RumexcrispusL.)的研究进展;第二章介绍了皱叶酸模根的化学成分及生物活性研究;第三章讨论了使用网络药理学的方法研究皱叶酸模根治疗湿疹的作用机制。<br> 皱叶酸模是蓼科(Polygonaceae)酸模属(RumexL.)的植物,根和根茎入药,最早出现在《草木便方》一书中,被称作牛耳大黄,中药材名为土大黄,性寒,苦中带有酸味,具有清热凉血、杀虫、通便等功效。前人对皱叶酸模根的工作主要是对其粗提物进行药理活性研究,而化学成分的研究相对较少。本论文对皱叶酸模的根开展了系统的化学成分和生物活性研究。利用多种现代色谱及波谱技术,从该植物的甲醇提取物中分离鉴定40个化合物。采用1D/2D核磁共振波谱、质谱、旋光、紫外、CD谱以及X-射线单晶衍射等方法对其化学结构进行鉴定,化合物类型涉及葸醌及其配糖体、萘及其配糖体、黄酮类和色原酮类等。其中葸醌类包括蒽醌苷元,氧苷蒽醌,碳苷葸酮以及裂环蒽醌苷,通过外标法对其中的大黄素和大黄素甲醚进行定量分析,结果显示皱叶酸模根中含有大黄素和大黄素甲醚的含量分别为为0.546mg/g和1.548mg/g;萘类主要是酸模素的苷类成分及萘酮。其中有4个新化合物,包括一个裂环葸醌苷和3个萘酮类成分。对新裂环葸醌苷提出可能的生物合成途径,它的形成可能是和GedF(GeodinsynthesisproteinF)和GedK(GeodinsynthesisproteinK)两个酶有关,它们共同催化了开环过程。<br> 对分离得到的部分化合物进行了抗真菌、抗氧化、抗炎、抗肿瘤等活性评价。结果显示化合物emodin(9)对三种皮肤病真菌:絮状表皮癣菌(Epidermophytonfloccosum)、红色毛癣菌(Trichophytonrubrum)、石膏样小孢子菌(Microsporumgypseum)有着较强的抑制作用,尤其是对絮状表皮癣菌(MIC50=2.467±0.03μM)石膏样小孢子菌(MIC50=4.673±0.077μM),并且化合物9在50μM浓度条件下有微弱的抗炎作用。同时所选取的4个裂环蒽醌苷化合物对5株人类肿瘤细胞抑制活性不明显。构效关系分析表明蒽醌类化合物的抗真菌(絮状表皮癣菌和石膏样小孢子菌)及抗炎活性测试中蒽醌苷元的活性最强,特别是大黄素,氧苷和碳苷蒽酮类成分活性次之,裂环葸醌苷成分可能是由于母核中C-10和C-4a位之间的键断开的原因,导致其活性下降。抗氧活性测试显示,黄酮类成分的活性强于葸醌类和萘类。<br> 运用网络药理学及分子对接等手段,探讨了皱叶酸模根治疗湿疹(eczema)的作用机制,利用Cytoscape3.6.1软件构建皱叶酸模活性成分-靶点网络、蛋白相互作用(PPI)网络,并通过CytoNCA插件功能构建疾病-成分-靶点网络,筛选出皱叶酸模根治疗湿疹的核心靶点,最后使用R3.6.3软件进行GO和KEGG通路富集分析,预测可能的作用机制,并绘制GO和KEGG气泡图进行数据可视化。得出关键基因主要是STAT3、PTGS2、PPARG、AKT1、HRAS、PTPRC、ALB、SRC、ERBB2等。其中起主要作用的活性成分为大黄素甲醚、大黄酚、1,8-二羟基-3-甲基-9-蒽酮等化合物。将核心成分与9个核心靶点的分子对接结果展示了核心靶点与核心成分之间良好的结合活性,这也印证了皱叶酸模根治疗湿疹的科学性。本论文的研究结果将为皱叶酸模的进一步利用提供一定的科学基础。
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