检索历史 清除

摘要缝隙连接(gap junction)是一种定位于细胞膜的连接通道，主要负责细胞间电信号及小分子物质的直接传递。缝隙连接通道由缝隙连接蛋白组成，脊椎动物中的缝隙连接蛋白包括Connexin和Pannexin，无脊椎动物中的缝隙连接蛋白为Innexin。缝隙连接通道的半衰期往往只有几个小时，暗示其需要特定的高效转运体系来实现缝隙连接蛋白在细胞内的快速转运。缝隙连接的功能异常会引发多种人类疾病，但这些疾病的相关突变是如何阻止缝隙连接蛋白转运至细胞膜上发挥作用的相关分子机制仍然未知。<br>　　新合成的分泌蛋白通过COPⅡ从内质网转运到高尔基体。一部分货物蛋白可以通过与COPⅡ组分直接结合被招募到COPⅡ中，一部分货物蛋白需要运货受体(cargo receptor)的帮助进入COPⅡ中。目前的研究已经发现了一些帮助分泌蛋白在细胞内转运的运货受体，但特异性运输缝隙连接蛋白的运货受体需要被发现和研究。<br>　　我们之前的研究发现:COPⅡ的附属蛋白ERV-41和ERV-46是缝隙连接蛋白UNC-9定位在细胞膜上所必需的。ERV-41和ERV-46最初在酵母中被发现，但单细胞生物酵母中没有缝隙连接。因此，ERV-41和ERV-46在多细胞生物中所发挥的作用尚不清楚。本研究中，我们利用含erv-41全部基因组信息的福斯质粒发现ERV-41呈点状分布在内质网上，利用标记基因发现ERV-46呈网格状定位在内质网上。erv-41和erv-46基因突变可以改变缝隙连接蛋白UNC-9的膜定位状态。通过共标实验我们发现在缺乏ERV-41或/和ERV-46的情况下，缝隙连接蛋白UNC-9主要累积在内质网中。实时爬行轨迹追踪表明:erv-41和erv-46基因突变导致线虫产生轻微的运动缺陷。为了进一步探索ERV-41和ERV-46在细胞中的调控机制，我们利用蛋白质质谱技术系统地寻找了ERV-41或ERV-46潜在的运输底物和调控因子，并对其中有代表性的潜在结合蛋白进行了验证。<br>　　综上所述，本研究一方面丰富了对ERV-41和ERV-46在多细胞生物中所发挥作用的认识，另一方面为缝隙连接形成的在体机制研究提供了新的线索。