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摘要目的:首先采用网络药理学的方法，对定心方Ⅲ号方(DingxinRecipeⅢ，DXRⅢ)治疗动脉粥样硬化(Atherosclerosis，AS)的分子靶点进行探讨和研究，进一步揭示DXRⅢ中各成分的药理作用，从而阐明DXRⅢ防治动脉粥样硬化的活性成分和作用机理。再通过体外实验，以H2O2诱导的衰老人脐静脉内皮细胞为研究对象，探讨DXRⅢ通过调控AMPK/SIRT1通路对衰老内皮细胞的干预作用，为明确内皮细胞衰老在AS形成过程中的作用机制以及DXRⅢ通过延缓血管内皮衰老来防治动脉粥样硬化提供相关的实验依据。<br>　　方法:首先采用TCMSP获取DXRⅢ的活性成分及其作用靶点;通过GeneCards、DisGeNET和CTD获取AS的相关靶点，并与DXRⅢ活性成分相关靶点取交集;基于Cytoscape3.7.0软件建立DXRⅢ治疗AS的药物活性物质-靶点-疾病网络并进行网络拓扑学分析;通过STRING分析并建立靶点蛋白质交互作用关系网络(PPI)并进行网络拓扑学分析;再使用R.0.3软件对相关GO功能富集分析与KEGG通路富集分析。离体实验则采用过氧化氢(H2O2)诱导人脐静脉内皮细胞(Humanumbilicalveinendothelialcells，HUVECs)建立衰老模型，再予以不同浓度DXRⅢ含药血清进行干预，利用MTT法检测细胞增殖活力，衰老特异性β-半乳糖苷酶(Senescence-associated-β-galactosidase，SA-β-gal)染色法检测细胞衰老程度，JC-1荧光探针检测细胞内线粒体膜电位变化(Mitochondrialmembranepotential，MMP)，RT-qPCR检测衰老相关分泌表型(包括TNF-α、IL-6、IL-1β、ICAM-1、VCAM-1)和p16、p21、p53的mRNA表达情况，Westernblot分别检测衰老相关蛋白p16、p21、p53以及p-AMPK、AMPK、SIRT1蛋白的表达情况。<br>　　结果:经过筛选以及分析，结果发现DXRⅢ共含有150个生物活性物质，主要包括槲皮素、菠菜甾醇以及黄芩苷等;防治AS的潜在靶点共33267个，主要包括TNF-α、IL-6、ICAM1、VCAM1、PTGS2、SIRT1、MAPK1等;GO和KEGG富集分析结果显示，分别涵盖1793个生物过程和153条通路，主要是与脂质代谢、动脉粥样硬化、细胞衰老、炎症、氧化应激、血管内皮损伤等病理过程相关。细胞实验研究证实200μmol/LH2O2干预HUVECs细胞48h可成功诱导其分化为衰老细胞，而DXRⅢ可下调TNF-α、IL-6、IL-1β、ICAM-1、VCAM-1的mRNA表达，可维持线粒体MMP，同时还可以通过下调p16、p21、p53的蛋白及mRNA表达，并上调p-AMPK和SIRT1蛋白的表达水平，从而改善H2O2诱导的内皮细胞衰老。<br>　　结论:通过网络药理学分析和体外实验证实DXRⅢ可改善AS，其作用机制可能与激活AMPK/SIRT1通路，进而抑制衰老相关蛋白和炎性因子的表达，从而缓解血管内皮细胞衰老相关。