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摘要目的:观察附睾特异性敲除Slc22a5对雄性小鼠生殖功能的影响、精子膜脂质成分的变化和附睾脂质代谢相关基因的表达情况。<br>　　方法:利用附睾特异性表达重组酶Rnase10-iCre小鼠与Slc22a5fl/fl小鼠交配得到附睾特异性敲除Slc22a5雄性小鼠模型。将基因型为Slc22a5fl/fl，Rnase10iCre/wt的雄性小鼠设为敲除组，Slc22a5fl/fl，Rnase10wt/wt的雄性小鼠设为对照组。两组小鼠分别与野生型雌鼠交配，测试小鼠的生育力。小鼠麻醉处死后解剖取材，检测小鼠附睾OCTN2的表达量、附睾脏器指数、附睾尾精子检测精子参数(精子活力、精子浓度、顶体完整率)。对附睾组织进行HE染色，观察组织形态学的变化。利用液相色谱质谱分析雄性小鼠附睾尾精子膜脂质成分。提取附睾组织的RNA，利用PCR阵列检测附睾脂质代谢相关基因的表达。差异基因使用GeneOntology和STRING数据库进行分析。<br>　　结果:1.对照组小鼠附睾OCTN2的表达较敲除组高4.6倍。2.敲除组产仔数目(14.17±1.47vs5.83±4.58)、精子活力(68.33±5.61％vs58.50±5.68％)、顶体完整率(71.50±3.93％vs62.17±8.66％)均较对照组降低(P＜0.05)，而附睾脏器指数(左侧附睾:0.11±0.49％vs0.11±0.27％)、(右侧附睾0.11±0.33％vs0.11±0.36％)和精子浓度[(35.54±7.00)×106/100mgvs(31.04±16.11)×106/100mg]无显著性差异(P＞0.05)。3.HE染色显示，敲除组与对照组小鼠的附睾头、体、尾部上皮细胞组织结构完好，细胞排列规律整齐，未见炎性细胞浸润等病理性变化，管腔内见大量精子。两组附睾形态均正常，无明显差异。4.附睾尾脂质成分分析结果显示，差异表达脂质有67个，其中47个上调，20个下调。敲除组PUFA的相对含量较对照组降低。KEGG通路分析提示差异表达脂质富集到甘油磷脂、亚油酸、α-亚麻酸、糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白合成、甘油酯和花生四烯酸的代谢通路。5.PCR阵列检测结果显示，30个与脂质代谢相关的基因表达有差异，Acox2、Acsm2、AkrId1、Apoa1、Apob、Apol8、Cdh13、Cyp11a1、Dkk1、Enpp7、Fabp9、Fgf10、Idi2、Lrp1b、Nr0b2、Scarf1、Sphk2、Wnt3a表达上调，Acsm3、Acot8、Cebpa、Cebpd、Cf、Elovl4、Fgf2、Gata3、Lep、Ncor2、frp1、Slc27a1表达下调。GO富集分析显示，Slc22a5可能参与胆固醇代谢、脂肪细胞分化、脂质合成与脂质分解、脂肪酸代谢、Wnt信号通路、Notch信号通路等生物过程，行使脂肪酸连接酶、脂蛋白颗粒结合、蛋白-脂质复合物结合、脂蛋白颗粒受体结合等生物功能。STRING数据库和Cytoscape软件构建差异基因相互作用网络，得出Lep、Cebpa和Fgf可能在Slc22a5调控脂质代谢通路中发挥重要作用。<br>　　结论:附睾特异性敲除Slc22a5可以导致雄性小鼠生育力下降，精子活力和顶体完整率降低，改变精子膜脂质的成分，其机制可能与附睾脂质代谢改变有关。