摘要珊瑚礁生态系统是南海典型生态类型之一,蕴藏丰富的微生物资源,且存在着纷繁复杂生物竞争环境,是海洋真菌天然产物和化学生态研究的理想区域。本论文以南海海域3个不同岛礁来源珊瑚真菌为研究对象,初步分析了其可培养真菌分布特征及与活性之间的关系,考察了10种分离培养基对真菌筛选分离能力的差异,分析了12种指示菌对真菌代谢产物抑制活性的强弱,同时对所获得的菌株进行了活性和化学筛选,获得15株生物活性显著、次级代谢产物类型丰富的菌株。并对其中的三株真菌Aspergillus hiratsukae SCSIO 5Bn1003、Aspergillus hiratsukae SCSIO 7S2001、Talaromyces aurantiacus SCSIO 7S5009的次级代谢产物进行了研究,主要研究成果如下:<br> 通过传统的平板培养法,利用10种不同的分离培养基从南海渚碧岛、永暑岛和美济岛的21份珊瑚样品中共分离得到真菌139株。其中,渚碧岛的13个珊瑚样品中分离得到66株,平均每个样品分离到真菌5.07株;永暑岛的4个珊瑚样品中分离得到22株,平均每个样品分离到真菌5.50株;美济岛的4个珊瑚样品中分离得到51株,平均每个样品分离到真菌12.75株,由此初步可见,美济岛珊瑚来源可培养真菌丰度明显高于渚碧岛和永暑岛。<br> 基于形态学特征、ITS和5.8S rDNA序列比对分析,初步鉴定了139份真菌中的126株,归类为子囊菌门的16个属,其中青霉属和曲霉属为优势菌群,占比分别为40%和26%。而在3个不同岛礁间,真菌种属分布也略有差异。渚碧岛珊瑚来源的60株真菌分布于11个属,青霉属和曲霉属为优势菌群,占比分别为49%和11%;永暑岛珊瑚来源的21株真菌分布于7个属,青霉属和曲霉属为优势菌群,占比分别为38%和33%;而美济岛珊瑚来源的45株真菌分布于9个属,曲霉属和青霉属为优势菌群,占比分别为34%和29%。<br> 进一步对其中的116株真菌进行了小试发酵,得到116份真菌代谢产物粗浸膏,采用纸片扩散法,考察了12种指示菌对真菌发酵产物粗浸膏抗菌活性差异,发现浸膏对革兰氏阳性菌的抑制效果好于革兰氏阴性菌。其中对藤黄微球菌和枯草芽孢杆菌表现最好,116份样品中分别共有35份和30份样品显示出抗藤黄微球菌和枯草芽孢杆菌活性,占总样品数的30.17%和25.86%。此外,还考察了10种不同培养基对真菌分离能力的差异,结果表明10种分离培养基均能成功分离至少一株真菌。其中,马铃薯琼脂培养基分离筛选效果最好,一共分离到58株真菌,占总数42%;其次是孟加拉红培养基和沙堡罗培养基,二者分别为23株和17株,占总数16%和占总数12%。<br> 最后,对三株珊瑚真菌的次级代谢产物进行了系统的分离鉴定,从中共分离鉴定45个化合物,包括8个新化合物。具体来说,从曲霉属真菌SCSIO 5Bn1003发酵产物中分离鉴定单体化合物15个,其中包括4个新化合物;从曲霉菌属真菌SCSIO 7S2001中分离鉴定单体化合物17个,其中包括1个新化合物,4个新天然产物;从篮状菌属真菌SCSIO 7S5009的发酵产物中分离鉴定单体化合物13个,其中包括3个新化合物。对所有化合物的生物活性进行了初步活性评价,发现化合物7-9具有显著的抗菌活性,化合物4,7,9对SF-268、MCF-7、HepG-2和A549等四种肿瘤细胞具有中等强度的细胞毒活性,化合物10,12,16,21,27和29具有显著的DPPH自由基清除活性,化合物7和9具有显著的α-葡糖糖苷酶抑制活性,化合物17-18,20-22,33,35,39,43具有微弱的乙酰胆碱酯酶抑制活性,化合物1具有微弱的抑制斑马鱼血管生成活性。<br> 综上,本论文对南海珊瑚来源真菌进行了分离筛选,并对其中三株活性真菌的次级代谢产物进行了研究,共分离真菌139株,化合物45个,包括8个新化合物,并发现一批具有显著抗氧化活性和α-葡糖糖苷酶抑制活性的化合物。以上研究丰富了海洋珊瑚真菌活性菌株资源库,拓展了珊瑚真菌天然产物的化学多样性,为珊瑚真菌资源的可持续利用和海洋药物的研发提供了物质基础。<br> 此外,本文还综述了1996-2021年间发表的292个珊瑚来源真菌新颖次级代谢产物研究进展。
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