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摘要三阴性乳腺癌(TNBC)占所有乳腺癌病例的近四分之一，但由于TNBC的细胞表面缺乏其它亚型乳腺癌最常见的三种受体表达，因此该疾病的有效靶向性治疗仍然难以实现。乳腺癌的中期诊断对其发展和预后至关重要。据报道，TNBC乳腺癌患者化疗后可转变为表皮生长因子受体2(HER-2)阳性，然后采用针对HER-2的曲妥珠单抗治疗将有更好的预后。因此，准确检测化疗后HER-2在乳腺癌细胞中的表达非常重要。在此，我们设计合成了一种以生物素修饰的牛血清蛋白(BSA)为配体的荧光Au簇分子探针，并建立了基于HER-2/一抗生物素/亲和素/金簇分子的质谱定量方法。利用金簇的荧光特性和金属成分，通过电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)定量分析乳腺癌细胞中的HER-2水平。定量检测乳腺癌HER-2的表达，有助于评价三阴乳腺癌化疗后HER-2上调水平，并为后续曲妥珠单抗治疗提供定量分析依据。<br>　　上皮间充质转化过程(EMT)是肿瘤细胞侵袭和转移的初始步骤，在启动和促进癌症肿瘤细胞的侵袭和转移的过程中发挥重要作用。神经型钙粘蛋白(N-Cadherin)作为EMT过程中的一种重要肿瘤标志蛋白，该蛋白过度的表达会导致细胞间粘附能力降低，促使肿瘤细胞发生转移。肺癌是一类转移速度快、早期诊断难、晚期死亡率高的恶性肿瘤。测定N-Cadherin蛋白在肺癌细胞中的表达量可以为评判肺癌细胞的恶性程度、及其对其他组织的侵袭能力提供重要判断。因此，本论文主要开展的工作如下:<br>　　1.利用BSA为载体，将小分子化合物生物素(biotin)通过活化剂偶联至BSA。然后将纯化后的BSA-biotin作为模板合成了稳定且发荧光的BSA-biotin-Au簇探针。<br>　　2.本论文提出并设计了BSA与biotin偶联合成BSA-biotin-Au簇探针。由于生物素与亲和素的强亲和力，亲和素可以用作BSA-biotin-Au簇探针与HER-2抗体（biotin标记）的结合媒介。在细胞水平上通过金团簇的荧光可以观测到乳腺癌细胞的HER-2表达，从而实现肿瘤细胞HER-2的初步分析。通过电感耦合等离子体质谱技术(ICP-MS)测量了乳腺癌细胞HER-2结合的金属探针含量，其中SK-Br-3细胞上Au的平均质量为298.84±52.08 fg/细胞，MDA-MB-231细胞上的标记量为6.02±1.78 fg/细胞，用0.5μg/mL紫杉醇刺激后，MDA-MB-231细胞中的Au达到每个细胞中的含量为131.58±5.26 fg。该项工作在细胞水平上对三阴性乳腺癌细胞标志物蛋白HER-2进行原位观察和定量分析提供了一种新的方法。<br>　　3.在细胞水平上，首次将三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231通过紫杉醇的刺激，模拟临床的化学治疗，并对比紫杉醇刺激前后HER-2表达的变化。通过基于团簇探针的荧光分析和质谱定量分析、蛋白质印迹法(western blotting)， 证明MDA-MB-231细胞在紫杉醇的刺激后，肿瘤细胞HER-2的表达有明显提高。通过对肿瘤细胞生长的抑制实验，紫杉醇刺激后的MDA-MB-231细胞由于表达了较高水平的HER-2; 进一步， 采用曲妥珠单抗（HER-2靶向药）处理上述高表达了HER-2的乳腺癌细胞后，发现肿瘤细胞生长被有效抑制。<br>　　4.设计了有着靶向N-Cadherin蛋白功能的小肽序列金团簇，我们将该团簇用于三种肺癌细胞A549 、H157、Calu-3的荧光成像以及用于LA-ICP-MS的单细胞定量，可以精确得到三种肺癌细胞中单个细胞的N-Cadherin蛋白物质的量。A549、H157、Calu-3细胞的表达量分别为分别为1419±258、886±245、212±51 amol/cell。并且通过细胞侵袭实验验证了N-Cadherin蛋白的表达与肺癌细胞的侵袭转移能力正相关。