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摘要目的：结直肠癌(Colorectal Cancer,CRC)作为世界上第三大最常见的癌症类型，其死亡率位列全球最常见的癌症相关死亡率的第二位。在中国，情况也不乐观，CRC在国内所有恶性肿瘤的发病率和死亡率中分别排名第四和第五,严重威胁国人健康。研究结直肠癌的疾病机制，有利于发现干预靶点，为结直肠癌的精准治疗和新药研发指引方向。目前已有研究验证了外泌体中的miRNA过表达是外泌体参与癌症发展的机制之一，同时也有文献已经说明：miRNA是非小细胞肺癌、肝癌、乳腺癌等癌症的肿瘤启动子，提示外泌体中的miRNA可能是正常细胞与肿瘤细胞间的信息传递者，但其在结直肠癌中的作用机制仍没有过多的研究。目前，越来越多的学者已经通过实验验证DLG2(Discs大同源物2)参与调节控制恶性肿瘤的发生与进展，同时兼具肿瘤抑制作用和肿瘤促进作用，主要取决于肿瘤细胞依赖的微环境。利用生信分析发现DLG2在结直肠癌中的表达相较于正常组织降低，可能作为一个肿瘤抑制因子参与结直肠癌的发生发展。基因预测发现miR-181a-5p是DLG2的上游靶点。随后通过EVmiRNA数据库发现结直肠细胞中的外泌体表达水平高，其中miR-181a-5p在结直肠细胞外泌体中的表达也比较高。因此，本研究旨在通过细胞实验了解外泌体中的miRNA与DLG2对结直肠癌细胞的增殖、侵袭及迁移能力的影响，从而了解外泌体、miRNA与DLG2在调控结直肠癌的作用机制，为其治疗提供新的作用靶点。<br>　　方法：本实验先通过TIMER数据库分析以及生信分析验证DLG2在结直肠癌中的表达相较于正常组织降低。此外，在临床上收集193例患者经过手术切除的结直肠癌的病理切片并跟踪随访，每张片子行DLG2免疫组化后对照癌旁正常组织和癌组织的不同形态后进行分析。随后使用qRT-PCR和免疫印迹法分别检测信使RNA(mRNA)和蛋白的表达。进行报告基因预测以验证DLG2与miR-181a-5p之间的预测靶向关系，随后在EVmiRNA数据库验证特定miRNA在结直肠细胞外泌体中的表达。最后用miR-181a-5p及DLG2siRNA转染结直肠癌Caco2细胞株，与对照组的Caco2细胞系共同进行了伤口愈合试验和transwell侵袭试验，以评估miRNA与DLG2对Caco2细胞系的增殖、侵袭及迁移能力的影响。<br>　　结果：结果显示，DLG2在人类CRC肿瘤组织中显著下调，其中肿瘤部位和肿瘤大小(p＜0.01)与DLG2表达之间统计学有差异，但性别、年龄、淋巴结有无转移、肿瘤病理类型、有无远端转移、T分级等其他临床特征与DLG2表达之间统计学分析没有差异。此外，结直肠细胞中外泌体表达高，且miR-181a-5p在结直肠细胞外泌体中的表达也比较高。而在细胞实验中结果发现，转染了miR-181a-5p以及DLG2siRNA的Caco2细胞系会下调DLG2的表达，但是会减弱了结直肠癌细胞的增殖能力，同时也减弱了Caco2细胞系的侵袭、迁移能力，但无显著统计学差异。<br>　　结论：根据上述实验结果来看，DLG2在结直肠癌细胞中的表达降低，并与肿瘤部位以及肿瘤大小之间有统计学意义，但与性别、年龄、肿瘤类型以及其他临床病理特征无统计学意义。MiR-181a-5p在结直肠细胞外泌体中表达水平高，且其会降低DLG2在结直肠癌细胞中的表达，从而降低结直肠癌肿瘤细胞的增殖能力，但对于结直肠癌细胞的侵袭能力以及迁移能力的影响无明显统计学差异。