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摘要研究目的：周围神经损伤后的骨骼肌萎缩是临床治疗难点，目前国内外最新研究利用非编码RNA调控骨骼肌的成肌分化过程。我们在前期工作中，已对失神经后萎缩的小鼠腓肠肌进行全转录组分析，识别出与骨骼肌生成及分化相关的长链非编码RNA XLOC_015548可作为关键靶点。本实验进一步探讨XLOC_015548与成肌分化的相关性,验证其对成肌分化的调控作用，同时协同锂离子促进肌分化及肌生成。<br>　　研究方法：(1)通过CCK-8法筛选锂离子对C2C12细胞的适宜作用浓度，并根据最适条件将细胞进行分组;通过肌管成型实验、肌管收缩实验、免疫荧光实验评估锂离子对C2C12肌管分化水平及肌管活力的影响;利用qPCR和Western Blot检测锂离子对成肌分化基因(MyoD、Myogenin)和MAPK信号通路(MEK/ERK)的表达情况。(2)构建XLOC_015548的过表达及敲低C2C12细胞系，通过CCK-8法细胞增殖实验、EdU法细胞增殖实验、Calcein-AM/PI死活双染色实验检测XLOC_015548对C2C12的细胞增殖及活力的影响;通过肌管成型实验、肌管收缩实验、免疫荧光实验检测XLOC_015548对C2C12肌管分化水平及肌管活力的影响;利用qPCR和Western Blot检测XLOC_015548对成肌分化基因和MAPK信号通路的表达情况;利用Western Blot验证锂离子对XLOC_015548敲低组的成肌分化相关基因的影响。<br>　　研究结果：(1)不同浓度锂离子处理C2C12细胞结果显示，与其他各组相比，0.5mmol/L、0.75mmol/L、1mmol/L、1.25mmol/L、1.5mmol/L锂离子是促进C2C12增殖的适宜条件，此条件下增殖的细胞数量最多;1mmol/L、2mmol/L、5mmol/L锂离子均可以促进C2C12向肌管细胞分化;qPCR结果显示MyoD、Myogenin、MyHC、MEF2C、MRF4、Myf5等成肌分化基因的mRNA的表达水平上调，Western Blot结果显示MyoD、Myogenin、MyHC、β-catenin、Wnt5a以及p-GSK3β、p-ERK、p-MEK的蛋白表达水平上调(P＜0.05);肌管分化实验及肌管收缩实验中，锂离子可以增加分化的肌管长度，提高肌管的收缩活性。(2)与对照组相比，XLOC_015548过表达组在肌管分化及收缩实验中分化出体积更大、数量更多的肌管，同时表现出更强的收缩活力;免疫荧光结果显示，XLOC_015548过表达组细胞中表达更多的肌球蛋白重链阳性细胞。qPCR结果显示XLOC_015548过表达组MyoD肌源性分化因子的mRNA的表达水平上调，Western Blot结果显示MyoD、p-ERK、p-MEK的蛋白表达水平上调（P＜0.05）,XLOC_015548敲低组则表现出相反的结果;经锂离子作用后，XLOC_015548敲低组的肌管分化程度提高，Western Blot结果显示锂离子处理后XLOC_015548敲低组的MyoD肌源性分化因子表达水平上调（P＜0.05）。<br>　　研究结论：（1）锂离子可经MAPK信号通路促进C2C12成肌分化过程;（2）长链非编码RNA XLOC_015548可经MAPK信号通路影响肌生成及成肌分化，锂离子可缓解由于XLOC_015548敲低所造成的低成肌分化水平，并提高成肌分化程度。上述结果为临床防治肌萎缩的新策略提供实验数据支持。