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摘要目的：<br>　　分析人食管鳞癌顺铂耐药TE-1细胞株circRNA的基因表达谱变化，探索相关基因HDAC9的耐药作用机制，以便于研发可以抗顺铂耐药人食管鳞癌的新型靶向药物。<br>　　方法：<br>　　1.基因芯片技术筛选TE-1和TE-1/CDDP细胞中circRNA的差异表达基因，结合查阅相关文献，筛选出可信度较高的调控位点。生物信息学方法分析TE-1/CDDP细胞中产生差异表达的circRNA基因，并通过检索相关文献，筛选参与调控食管鳞癌顺铂耐药的候选基因，分析相应信号通路。<br>　　2.应用小干扰RNA技术构建3组si-HDAC9及1组si-NC,分别瞬转至顺铂耐药TE-1细胞，qRT-PCR检测HDAC9mRNA的表达水平，筛选干扰效果最好的进行后续实验。<br>　　3.克隆实验检测干扰HDAC9后顺铂耐药TE-1细胞的克隆形成能力。<br>　　4.CCK8(Cell-counting kit 8)实验检测干扰HDAC9后顺铂耐药TE-1细胞的增殖能力。<br>　　5.划痕实验检测干扰HDAC9后顺铂耐药TE-1细胞的迁移能力。<br>　　6.Transwell实验检测干扰HDAC9后顺铂耐药TE-1细胞的侵袭能力。<br>　　7.免疫印迹(Western blotting,WB)实验检测干扰HDAC9后顺铂耐药TE-1细胞相关蛋白的表达。<br>　　结果：<br>　　1.根据基因芯片上差异倍数(Fold change)值挑选可信度较高的差异基因。生物信息学方法分析TE-1/CDDP细胞中circRNA的差异表达基因(共410个)，KEGG富集分析提示以下通路有显著统计学意义(p＜0.01),分别为：碳代谢、p53信号通路、三羧酸循环(TCA循环)、丙酸代谢、碱基切除修复。根据基因芯片上p-value挑选可信度较高的分子靶点，再结合国内外相关新近文献报道结果，结合查阅文献，筛选出可能参与食管鳞癌顺铂耐药的相关基因HDAC9。<br>　　2.将 3组针对HDAC9的siRNA(si-HDAC9_001,002,003)和1组阴性对照组(si-NC)分别转染至TE-1/CDDP细胞，qRT-PCR结果显示与si-NC相比，si-HDAC9_003组细胞HDAC9mRNA表达水平明显降低(p＜0.01),提示其干扰效果最好，用于后续实验。<br>　　3.克隆实验结果表明，si-HDAC9组细胞的克隆形成能力较si-NC组细胞明显下降(p＜0.01)。<br>　　4.CCK8实验结果表明，干扰HDAC9后顺铂耐药TE-1细胞的增殖能力受到抑制(p＜0.01)。<br>　　5.划痕实验结果发现，干扰HDAC9后顺铂耐药TE-1细胞的迁移能力下降(p＜0.01)<br>　　6.Transwell实验发现，干扰HDAC9后顺铂耐药TE-1细胞的侵袭能力受到抑制(p＜0.05)。<br>　　7.Western blotting实验证明，在顺铂耐药TE-1细胞中干扰HDAC9后降低了PAI-1、AKT、ERK等蛋白的表达，表明顺铂耐药TE-1细胞增殖、迁移和侵袭能力增强的机制与HDAC9促使PAI-1上调、激活AKT和ERK信号通路有关。<br>　　结论：<br>　　1.与TE-1细胞对比，TE-1/CDDP细胞中circRNA共有410个差异表达基因，主要调控细胞的碳代谢、p53信号通路、三羧酸循环(TCA循环)、丙酸代谢和碱基切除修复。其中受circRNA调控的HDAC9在TE-1/CDDP细胞中的表达明显上调。<br>　　2.HDAC9促进了TE-1/CDDP细胞的增殖、迁移和侵袭。<br>　　3.TE-1/CDDP细胞增殖、迁移和侵袭能力增强的机制与HDAC9促使PAI-1上调、激活AKT和ERK信号通路有关。