摘要目的:<br> 探讨可注射导电水凝胶聚吡咯-壳聚糖(Polypyrrole-Chitosan,PPY-CHI)促进大鼠心梗后心功能恢复的长期有效性及可能机制。<br> 方法:<br> 通过一步氧化还原法合成导电水溶液PPY-CHI,通过戊二醛交联法形成导电水凝胶,以2%壳聚糖(Chitosan,CHI)为对照;运用四探针法测定PPY-CHI导电特性及电传导损伤率研究其电化学特性;通过与新生大鼠左心室心肌细胞(Neonatal rat ventricular muscle cells,NRVMs)共培养,检测细胞数量及标记蛋白Cx-43、SARC表达水平,研究其生物相容性;在体内,采用SD大鼠左心室前降支结扎方法形成心肌梗死(Myocardial Infarction,MI)模型,四周后通过超声评估心功能,将LVFS小于25% MI老鼠随机分为3组,将等体积PPY-CHI、CHI水凝胶及生理盐水(Saline)注射入心梗及边缘区;在移植后4、8、12和22周,运用超声心电动图评估LVEF、LVFS和LVIDd随时间改变情况;在治疗终点,通过四探针评估心脏组织电阻,收获心脏标本,运用免疫荧光染色,检测毛细血管密度,评估PPY-CHI促血管生成能力,运用马松染色,检测左心室前壁胶原含量,评估心室重构水平。<br> 结果:<br> 1、在含有FeCl3的氧化还原反应中,可成功将吡咯单体集合成聚吡咯并铆钉在壳聚糖骨架上,戊二醛可使其形成PPY-CHI导电水凝胶;<br> 2、PPY-CHI 凝集时间是(26.4±2.19)s,与 CHI 没有差异;PPY-CHI、CHI导电率分别是(15.54±2.19)×10-3S/cm 及(2.79±0.74)×10-3S/cm,差异具有统计学意义;在0.5cm、1.0cm、1.5cm和2.0cm距离电压值分别为:PPY-CHI:(76.58±9.39)mV,(69.88±10.71)mV、(60.12±11.26)mV 和(53.64±10.58)mV,CHI:(30.8±3.20)mV、(18.34±1.74)mV、(11.74±1.87)mV 和(5.98±1.41)mV,差异具有统计学意义,PPY-CHI具有良好的导电性能,电信号在其内传导过程中损失低;<br> 3、NRVMs可在含有PPY-CHI、CHI涂层培养皿上粘附及生长,其细胞数量、节律性跳动、CX-43及SARC表达水平与常规培养皿上没有明显差异,表现出良好生物相容性;<br> 4、左心室前降支线线栓结扎法可成功构建大鼠MI模型,通过心肌内注射可将PPY-CHI、CHI水凝胶移植到心梗及边缘区。在移植后22周,PPY-CHI组LVEF、LVFS 和 LVIDd 较梗后分别提高:(16.6±1.82)%、(10.6.4±0.55)%和(2.208±0.02)mm,CHI 组 LVEF、LVFS 和 LVIDd 较梗后分别提高:(10.4±6.88)%、(3.8±1.64)%和(3.35±0.03)mm,Saline 组 LVEF、LVFS 和 LVIDd 较梗后分别提高:(5.2±5.59)%、(1.2±1.92)%和(3.63±0.15)mm;<br> 5、实验终点,PPY-CHI、CHI和Saline组心梗部位电阻值与边缘区域比值分别为:(81.25±6.02)%、(92.53±5.24)%和(81.25±6.02)%;免疫荧光染色显示,三组荧光强度占比:(8.22±1.06)%、(6.73.11±0.36)%和(4.21±0.99)%;马松染色示,三组胶原占比:(25.63±0.40)%、(19.11±0.69)%和(14.59±0.79)%。以上数据表明,与Saline和CHI组相比,PPY-CHI具有更低的组织电阻,毛细血管密度和瘢痕区心室壁厚度显著增加。<br> 结论:<br> 可注射导电水凝胶具有良好的可注射性,导电性和生物相容性,是细胞生长的良好载体。心肌内注射PPY-CHI可以持续降低瘢痕组织电阻,促进血管生成,降低了瘢痕区组织电阻和抑制心室重构,促进慢性心肌梗死后心脏功能的修复,为慢性缺血性心肌病的防治指出了一种的新策略。
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