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摘要目的：<br>　　近年来，神经酰胺代谢在肿瘤化疗耐药过程中的作用逐渐被揭示。本课题组初步研究发现LSD1可能参与调控了结直肠癌细胞的神经酰胺代谢，但神经酰胺代谢在食管鳞癌细胞化疗耐药过程中的作用尚不清楚，LSD1是否通过调控神经酰胺代谢从而影响食管鳞癌细胞的化疗耐药也无相关研究。因此本研究旨在探索LSD1促进食管鳞癌细胞5氟尿嘧啶(5-FU)耐药的作用及分子机制，为克服其化疗耐药提供新靶点和新思路。<br>　　方法：<br>　　使用TCGA数据库以及WB检测LSD1在食管鳞癌病人组织样本中的表达情况;采用慢病毒装载的短发夹RNA(shRNA)构建LSD1稳定干扰的细胞株，并结合使用LSD1抑制剂SP2509,观察抑制LSD1后5-FU对食管鳞癌细胞的增殖抑制作用及诱导凋亡的作用;使用TCGA数据库筛选神经酰胺代谢中与LSD1表达有相关性的基因，并使用qPCR检测相关代谢基因在干扰LSD1后的表达情况;采用qPCR检测干扰LSD1表达并给予5-FU处理后，细胞中神经酰胺代谢相关基因的表达情况;构建耐药细胞株，MTT检测5-FU和LSD1抑制剂SP2509联用对敏感和耐药细胞株的增殖抑制作用;使用结晶紫染色观察LSD1抑制剂SP2509对敏感及耐药细胞株克隆能力的影响，并用qPCR法检测5-FU对敏感及耐药性细胞株中GBA2表达情况的影响。<br>　　结果：<br>　　1 TCGA数据库检索以及蛋白结果显示LSD1在食管鳞癌组织中异常高表达，并且干扰或抑制LSD1的表达可以增强5-FU对食管鳞癌细胞的增殖抑制作用;<br>　　2 干扰LSD1可以通过上调促凋亡蛋白BAX表达、降低Bcl-2表达、提高BAX/Bcl-2的比值，增强5-FU对食管鳞癌细胞的促凋亡能力;<br>　　3 LSD1抑制剂SP2509与5-FU联用对耐药细胞株的增殖具有协同抑制作用。<br>　　4 通过TCGA数据库检索发现，LSD1与多种神经酰胺代谢酶SMPD3、SMPD4、S1PR1、S1PR4、UGCG、B4GALT5、ACER1、GBA2 的表达有相关性，通过干扰LSD1可以上调食管鳞癌细胞中GBA2的表达;<br>　　5 给予5-FU处理后，食管鳞癌细胞中GBA2的表达升高，且干扰LSD1后细胞内GBA2的表达可进一步升高;<br>　　6 耐药细胞株中GBA2的表达显著低于敏感细胞株，且给予5-FU处理不能升高耐药细胞株中GBA2的表达;<br>　　结论：<br>　　1.LSD1可促进食管鳞癌细胞5-FU耐药，是调控食管鳞癌细胞5-FU耐药的新靶标;<br>　　2.LSD1抑制剂可与5-FU联合应用，协同抑制食管鳞癌细胞的增殖。<br>　　3.初步证明LSD1可通过下调GBA2的表达，抑制糖基神经酰胺水解为神经酰胺而使5-FU的促凋亡能力减弱，最终导致食管鳞癌细胞5-FU耐药。