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摘要糖尿病性白内障（Diabetic Cataract,DC）是糖尿病的常见并发症之一，即晶状体浑浊，亦是世界人口致盲的主要原因。糖尿病患者白内障发病时间早于非糖尿病患者，患者晶状体上皮细胞活性氧（Reactive oxygen species,ROS）的增加及其引起的上皮细胞纤维化是导致晶状体浑浊的主要因素。γ-谷氨酰半胱氨酸（γ-GC）作为谷胱甘肽（GSH）生物合成的直接前体和限制性底物，具有抗氧化和抗炎特性，但其是否对DC具有保护作用尚未被报道。本研究旨在通过体内外实验，探讨γ-GC对DC发生发展中的保护作用及其机制研究。<br>　　选用6周龄的C57BL/6J和db/db小鼠作为体内实验动物模型，均采用灌胃给药的方式。小鼠随机分组，各组小鼠均给予相同的饲喂条件，每周定时对小鼠体重、摄食量、血糖等指标进行监测，并定期观察小鼠眼睛浑浊程度。实验结束前用裂隙灯显微镜观察并拍摄小鼠眼睛浑浊状况，结束后剥离小鼠晶状体，采用苏木精-伊红染色法（H&E）检测眼睛组织病理变化，蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测晶状体组织中 AKR1B1、E-Cadherin、N-Cadherin、MMP-9、Snail 蛋白水平情况。其次,在体外实验中以人晶状体上皮细胞（HLECs）为研究对象，通过CCK8法检测γ-GC对细胞的毒副作用，以确定后续给药浓度，同时用含50 mM葡萄糖的高糖（HG）培养基刺激细胞24 h建立体外糖尿病性白内障的模型。随后检测凋亡相关蛋白，测定ROS、超氧化物歧化酶（SOD）和GSH/GSSH（氧化型GSH）以评估氧化应激水平。测定炎性因子释放及炎症信号通路MAPKs及NF-κB相关蛋白水平。通过Western Blot、酶联免疫吸附法（ELISA）检测DC关键蛋白AKR1B1,AGEs及其受体 RAGE 水平，检测 γ-GC 对 HG 细胞中 N-Cadherin、E-Cadherin、MMP-9、Snail、TGF-β、Smad2/3、p-AKT、p-AMPK 蛋白水平影响。<br>　　体内实验显示，与正常小鼠相比，模型组小鼠眼睛浑浊程度严重，高剂量γ-GC治疗组能明显减轻小鼠眼睛浑浊程度。H&E结果显示，模型组小鼠晶状体上皮细胞（LECs）形态不规则，排列无序，且出现向内呈纤维状细胞扩散，细胞间出现大量空泡的现象。给药处理组LECs损伤减轻，其中高剂量γ-GC处理组大多数细胞排列整齐，未出现大量细胞向内扩散现象。体外实验中，γ-GC保护HLECs免受HG诱导的细胞凋亡;γ-GC降低HLECs内ROS水平，提高SOD和总GSH并调节GSH/GSSG比例，进而抑制细胞氧化损伤。同时γ-GC通过抑制NF-κB、MAPKs信号通路减少炎症因子TNF-α和IL-6的释放。此外，γ-GC能够显著抑制由AKR1B1蛋白水平异常积累引起的HLECs细胞EMT进程。HG诱导的HLE细胞TGF-β/Smad信号通路被激活、p-AKT蛋白水平增加，p-AMPK明显被抑制，而γ-GC逆转这一趋势。<br>　　综上所述，我们的研究表明:γ-GC对糖尿病小鼠白内障的发生发展具有显著的保护作用，主要是通过清除ROS并上调GSH含量保护HLE细胞免受氧化损伤诱导的细胞凋亡，并进一步通过调控TGF-β/Smad-AKT和AMPK相关信号通路抑制由AKR1B1积累引起的EMT进程，进而抑制晶状体浑浊。这为日后γ-GC成为预防或治疗糖尿病性白内障的候选二肽提供重要的理论依据。