摘要脱落酸是一种重要的植物激素,在植物细胞工程和种子保藏方面具有广阔应用前景.微生物发酵法产生ABA是近年来兴起的生产ABA的新方法.该研究目的在于分离筛选ABA产生菌,并针对生物合成关键酶的调控进行诱变筛选,以期得到高产ABA菌株,为发酵法生产ABA的工业化奠定基础.实验中根据脱落酸(ABA)的化学性质,首次应用MALLABY显色法快速鉴定产ABA的阳性株,并根据植物病理学和微生物生态学原理,建立了ABA产生菌的筛选的方法,有效地分离到多株ABA产生菌,其中一株产量可达39.2ug/gPDA培养基.对所得高产菌株培养条件进行了优化,固体发酵7天可积累ABA1mg/g培养基以上.实验中对产品的分离纯化进行了初步研究,通过丙酮抽提、乙酸乙酯萃取、硅胶柱层析等步骤可获得ABA结晶.根据真菌中ABA的生物合成途径,经抗酶抑制剂筛选,得到的抗性株ABA产量增加,推断3-羟-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶为其生物合成关键酶.通过RT-PCR半定量地分析了BotrytiscinereaA101及UUD-1菌中HMG-CoA还原酶的表达水平.
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