换一批摘要Caspase家族在细胞凋亡中发挥着非常重要的作用,该实验通过观察四种Caspase抑制剂对化学性缺血造成体外培养的牛主动脉内皮细胞损伤的影响,希望能进一步明确缺血性内皮细胞凋亡的分子机制,为研制血管保护性药物提供理论线索.研究了葛根素对缺血性内皮细胞损伤的保护作用.该实验观察了其对缺血缺氧状态下内皮细胞凋亡的作用,希望进一步明确其治疗作用的机制,并为治疗新的适应症提供理论参考.该实验以氰化钠合并无糖培养基造成化学性缺血缺氧模型,在此基础上,进行台盼兰染色观察细胞的受损死亡情况;采用DNA琼脂糖凝胶电泳、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术检测凋亡细胞DNA的断裂;采用流式细胞仪分析技术监测特异性凋亡峰;进行Hoechst33342染色观察凋亡细胞染色质凝聚现象,并通过免疫细胞化学染色方法观察受损内皮细胞Caspase-3的表达.结果提示,Caspase抑制剂至少通过减少细胞DNA断裂和染色体凝聚而减轻化学性缺血对内皮细胞的损伤,在缺血性内皮细胞凋亡的发生机制中至少存在Caspase-1、Caspase-3、Caspase-6的参与,在Caspase的蛋白酶级联切割反应中Caspase-1、6位于Caspase-3的上游.葛根素可减少缺血性内皮细胞凋亡的发生,对Caspase-3的表达也有明显的抑制作用.
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