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摘要NK/T细胞淋巴瘤(NK/T cell lymphoma,NKTCL)是一种主要由NK细胞或T细胞系组成的结外淋巴瘤，其特征是血管损伤和破坏、明显坏死、细胞毒性表型以及与EB病毒相关。目前该肿瘤发病机制仍不明确，现有治疗方法包括化疗、放疗和免疫治疗等，但患者对治疗的反应均欠佳，总体生存期短，预后较差。因此，亟待进一步阐明NKTCL的发病机制并寻找新的有效的治疗策略。GSK-3β是糖原合酶激酶-3(glycogen synthase kinase3,GSK-3)的一个重要亚型，参与了很多肿瘤信号通路的调控。GSK-3β的异常激活及核内表达异常增加在多种淋巴造血或免疫相关肿瘤的发生发展中起重要作用。GNAQ属于Gαq/11的蛋白家族，G蛋白偶联受体系统在真核生物的正常信号传递中起到关键作用，相关分子的突变也可导致多种肿瘤的发生。在T淋巴细胞中GANQ是一个抑癌基因，抑癌基因转录起始区域的DNA高甲基化是肿瘤发生发展的重要机制。在T淋巴细胞和B淋巴细胞中，GNAQ可负性调控PI3K-AKT通路，当GNAQ表达降低或功能缺失时，其下游的PI3K-AKT通路激活，可能会导致肿瘤的发生。综上推测GSK-3β异常激活和GNAQ表达降低或功能缺失可能参与了NKTCL的进展，但二者在NKTCL中的表达及意义尚不明确。鉴于此，本文将进行以下研究，希望为进一步探究NKTCL的发病机制提供新的理论依据。<br>　　目的：1.检测NKTCL中的GSK-3β蛋白及其磷酸化水平，并分析它们与临床预后的关系。<br>　　2.检测NKTCL中GANQ的蛋白水平，并分析其和GSK-3β及其磷酸化水平的相关性及与临床预后的关系。<br>　　3.搜集相关NKTCL患者的病理及临床资料，探究上述蛋白指标与临床因素、病理参数及预后之间的关系。<br>　　方法：1.搜集郑州大学第一附属医院2019年至今根据2017年版《WHO淋巴与造血组织肿瘤分类》诊断为NKTCL患者的石蜡组织标本61例。另外选取同期20例鼻腔炎性黏膜组织标本作对照。<br>　　2.搜集上述病例的相关临床数据：性别、年龄、首发部位、PINK-E预后指数、临床分期（Ann Arbor分期），血清乳酸脱氢酶（LDH）及β-微球蛋白（β--MG）含量、血EBV-DNA水平、有无B症状、有无淋巴结的转移、预后资料等。<br>　　3.在NKTCL及其对照组中进行GSK-3β、p-Y216-GSK-3β的免疫组化检测,分析比较其表达差异。<br>　　4.在NKTCL及其对照组中进行GNAQ的免疫组化检测，分析比较其表达差异，并分析GNAQ和GSK-3β及其磷酸化水平之间的相关性关系。<br>　　5.探究上述3个指标（GSK-3β、p-Y216-GSK-3β、GNAQ）与搜集到的临床相关数据及预后之间的关系。<br>　　6.采用SPSS24.0进行统计分析：三种蛋白指标的相关性分析采用Spearman秩等级相关法;分类变量的比较采用卡方检验或Fisher精确概率法;生存分析采用Kaplan-Meier生存曲线法、Log-rank检验及单因素和多因素Cox比例风险回归模型法。双侧P值＜0.05具有统计学意义。<br>　　结果：1.随访时间截止到2022年12月31日，随访时间1-47个月，中位随访时间为25个月，随访结果为40例存活，17例死亡，4例失访，平均生存时间为35.5月，3年生存率为71.3％。<br>　　2.GSK-3β及其磷酸化水平在NKTCL中的表达显著高于在对照组中的表达（P＜0.05）,GNAQ蛋白在NKTCL中的表达显著低于在对照组中的表达（P＜0.05）,差异具有统计学意义。<br>　　3.Spearman相关性分析显示，GSK-3β与p-Y216-GSK-3β蛋白存在中等强度的正相关关系（r=0.529,P＜0.01）;GSK-3β与GNAQ蛋白存在中等强度的负相关关系（r=-0.428,P=0.001）;p-Y216-GSK-3β与GNAQ蛋白存在中等强度的负相关关系（r=-0.468,P＜0.01）<br>　　4.卡方检验分析结果显示，各项临床指标在三项蛋白的高表达组与低表达组之间的分布均没有统计学差异（P＞0.05）。<br>　　5.Kaplan-Meier生存曲线图显示，GSK-3β高表达组的OS显著低于低表达组（P=0.002）,高表达组与低表达组的5年OS率分别为53.6％、89.5％;p-Y216-GSK-3β高表达组的OS显著低于低表达组（P=0.021）,高表达组与低表达组的5年OS率分别为60.1％、90.5％;GNAQ高表达组的OS显著高于低表达组（P=0.036）,高表达组与低表达组的5年OS率分别为93.3％、63.5％。<br>　　6.Kaplan-Meier法分析各项临床资料，结果显示高Ann Arbor分期、PINK-E中高危组、高LDH含量和高β2-MG含量组的患者具有更低的OS（P＜0.05）。但是在年龄、性别、发生部位、有无B症状、淋巴结转移情况、血EBV-DNA含量的分布区别中，生存时间的差异不具有统计学意义。<br>　　7.单因素COX回归分析显示：高GSK-3β表达、高p-Y216-GSK-3β表达、低GNAQ表达、高Ann Arbor分期、高PINK-E预后评分及高LDH水平是OS降低的影响因素（P＜0.05）。将上述6项变量纳入多因素COX回归进一步分析显示：高GSK-3β表达、低GNAQ表达及高Ann Arbor分期是OS降低的独立危险因素（P＜0.05）。<br>　　结论：NKTCL组织中GSK-3β及其磷酸化蛋白水平表达明显增强，而GNAQ蛋白的表达明显减弱，同时发现GSK-3β的高表达与GNAQ的低表达与NKTCL的预后不良相关。为NKTCL发生发展机制研究及新的治疗靶点的寻找提供了新的理论基础。