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摘要缺氧-酸中毒是心肌梗死和心力衰竭等心血管疾病的常见病理生理过程，它可引起心肌细胞能量代谢的紊乱和氧化应激，从而导致线粒体功能损伤和细胞凋亡。此外，缺氧-酸中毒可导致血管内皮细胞功能紊乱和炎症反应，进而引起血管损伤和收缩功能下降。因此，缺氧和酸中毒对心血管疾病的影响是一个复杂的过程，涉及多个细胞类型和生物学过程，深入研究缺氧-酸中毒对心血管系统的影响机制，可以为心血管疾病的预防和治疗提供新的思路和策略。<br>　　微小RNA通过结合靶基因的3''端非编码区(3''untranslated region,3''UTR),降解靶基因信使RNA或抑制靶基因的翻译发挥调节作用。微小RNA-126(miR-126)是一种血管内皮高度表达的微小RNA,对于维持内皮细胞完整性、调节血管生成、预防动脉粥样硬化和调节血管功能等方面具有关键作用。尽管miR-126已经被证明在许多心血管疾病中发挥重要作用，但其在缺氧-酸中毒中的作用尚未完全明确。<br>　　目的：<br>　　探讨miR-126在缺氧-酸中毒诱导的心肌细胞凋亡和血管内皮炎症中的作用,以期为深入理解心血管疾病的发生和发展提供新的实验依据。<br>　　内容：<br>　　第一部分:miR-126对心肌梗死的调控机制:基于靶基因通路的生物信息学分析。应用NCBI的GEO数据库筛选数据集，选择GSE24591数据集进行miRNA表达分析。利用Sangerbox进行差异分析和作图，通过miRWalk对miRNA-126-5p进行靶基因预测，使用clusterProfiler R包进行GO和KEGG通路的富集，同时使用StringDB寻找靶基因的相互作用网络，并通过Cytoscape绘制靶基因的相互作用网络。<br>　　第二部分:miR-126在缺氧-酸中毒诱导的心肌细胞凋亡中的作用。（1）在缺氧酸中毒条件下培养小鼠心肌细胞，利用RT-qPCR检测miR-126的表达水平，使用TUNEL法评估凋亡的程度，并通过免疫印迹检测炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8的水平。（2）在心肌细胞转染antimiR-126前后进行缺氧酸中毒培养，利用RT-qPCR检测miR-126的表达，使用TUNEL法评估凋亡的程度，并通过免疫印迹检测炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8的水平。（3）在心肌细胞转染antimiR-126前后进行不同程度的缺氧酸中毒培养，通过免疫印迹检测炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8的水平。（4）在心肌细胞转染antimiR-126前后进行缺氧酸中毒培养，通过免疫印迹检测p-p38、p-JNK和Bcl-2的表达。<br>　　第三部分:miR-126在缺氧酸中毒诱导的血管内皮炎症中的作用。（1）对血管内皮细胞进行缺氧酸中毒培养，通过RT-qPCR检测miR-126、HMGB1 RNA的水平，并通过免疫印迹检测HMGB1的蛋白表达水平（2）对血管内皮细胞进行缺氧酸中毒培养，通过蛋白免疫印迹检测NADPH、TNF-α、p-Akt、Bcl-2的水平，并使用DCFH-DA探针标记细胞中ROS水平。（3）在转染premiR-126或antimiR-126后对血管内皮细胞进行缺氧酸中毒培养，通过RT-qPCR 检测miR-126、HMGB1 RNA的表达水平，并通过蛋白免疫印迹检测HMGB1蛋白的表达水平。（4）构建包含野生型及突变型HMGB1基因3''UTR种子序列的双荧光素报告基因载体，并与miR-126-5p进行共转染，检测荧光素酶活性。（5）在转染premiR-126或antimiR-126后对内皮细胞进行缺氧酸中毒培养，通过DCFH-DA探针标记细胞中ROS水平，并通过免疫印迹检测NADPH、TNF-α、p-Akt 和 Bcl-2 的水平。<br>　　结果:<br>　　1、使用GEO数据库及Sangerbox分析工具，发现miR-126在心肌梗死组织中的表达量显著增高。生物信息学分析结果显示，miR-126可以调节MAPK信号通路，并对靶基因HMGB1具有调控作用。<br>　　2、缺氧酸中毒情况下，心肌细胞miR-126的表达增加，心肌细胞凋亡、炎症因子表达也显著增加。在基因转染antimiR-126后，缺氧酸中毒引起的心肌细胞凋亡、炎症因子表达减轻。<br>　　3、缺氧酸中毒情况下，心肌细胞p38、JNK磷酸化水平增强，Bcl-2表达下降;心肌细胞转染antimiR-126后，p38、JNK磷酸化水平被削弱，抗凋亡因子Bcl-2表达增加。<br>　　4、缺氧酸中毒情况下，内皮细胞转染antimiR-126后HMGB1表达增加，ROS、NADPH和TNF-α的表达增加，Akt磷酸化增强，Bcl-2的表达显著增加。<br>　　5、缺氧酸中毒情况下，内皮细胞中的miR-126通过与HMGB1基因3''UTR结合，从而促进HMGB1基因的降解并抑制其翻译过程，最终导致HMGB1表达的降低。<br>　　结论:<br>　　1、在心肌梗死组织中，miR-126的表达水平显著上调。生物信息学分析结果表明，miR-126可以调节MAPK信号通路并具有对靶基因HMGB1的调控作用。<br>　　2、心肌细胞缺氧酸中毒后，miR-126通过激活p38MAPK/JNK信号通路、抑制Bcl-2的表达，从而导致细胞凋亡反应。<br>　　3、内皮细胞缺氧酸中毒后，miR-126能够通过抑制HMGB1基因的表达下调炎症反应。