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摘要背景与目的:卵巢癌是女性常见的三大妇科恶性肿瘤之一，其致死率高居妇科肿瘤首位。卵巢癌发病隐匿，早期症状不易被察觉，约80％的患者一经诊断即为晚期。目前卵巢癌的标准治疗方法仍为手术联合铂类药物化疗，尽管卵巢癌对铂类化疗药物敏感，但易发生化疗耐药。靶向治疗的应用改善了卵巢癌患者的预后，但其获益人群有限且部分患者会发生耐药。因此，探寻新的生物标志物和药物治疗靶点一直是卵巢癌领域的研究热点。既往多项研究表明，RARG在多种恶性肿瘤的发生和发展中起到重要作用。然而，其在卵巢癌中的生物功能尚不清楚。本文旨在探寻RARG在卵巢癌中的异常表达及其与患者预后的相关性，并进一步探讨其在卵巢癌发生发展中的作用。<br>　　方法:本研究分别从GTEx数据库和TCGA数据库中纳入88个正常卵巢组织和379个卵巢癌组织样本，对样本的转录组数据及相关的临床病理信息进行整合分析，筛选出一个在卵巢癌组织中mRNA水平异常升高的分子RARG。以RARGmRNA水平中位数作为临界值，将预后信息完整的卵巢癌患者分为高水平组和低水平组，并进行Kaplan-Meier生存分析。使用ROC曲线评估RARGmRNA水平预测卵巢癌患者1年、5年和9年生存的准确性。通过单因素和多因素Cox回归分析(RARGmRNA水平、年龄、FIGO病理分期、肿瘤组织学分级)筛选与患者预后相关的危险因素，建立Nomogram模型，并通过校正曲线评估该模型的预测值与观测值的一致性。筛选RARGmRNA高水平组和低水平组之间的差异表达基因，进行GSEA富集分析，并探索其与肿瘤免疫浸润的相关性。利用qRT-PCR实验对10对正常卵巢组织和卵巢癌组织的RARGmRNA水平差异进行验证。选取49例卵巢癌组织和30例正常卵巢组织进行免疫组化实验用于检测RARG蛋白表达水平。随访以上49例卵巢癌患者的生存预后信息，根据RARG免疫组化IRS评分分为两组，进行Kaplan-Meier生存分析，采用单因素和多因素Cox比例风险回归分析，研究年龄、术前CA125水平、RARG免疫组化IRS评分、初始手术减瘤效果和铂类药物敏感性对卵巢癌患者总生存期的影响。分析RARG蛋白表达与临床病理特征的关系。特异性siRNA瞬时敲降和慢病毒干扰shRNA质粒稳定敲除卵巢癌细胞A2780和SKOV3中RARG表达，观察细胞增殖能力、集落形成能力、细胞周期及裸鼠皮下移植瘤模型中肿瘤的生长变化情况，用免疫组化实验检测RARG稳定敲除组和对照组中移植瘤组织切片的RARG、Ki-67、PCNA蛋白表达水平的差异。<br>　　结果:数据库分析结果显示，卵巢癌组织中RARGmRNA水平高于正常卵巢组织(P＜0.001)。亚组分析发现，相比于FIGOⅠ-Ⅱ期卵巢癌患者，FIGOⅢ-Ⅳ期患者的RARGmRNA水平升高(P=0.027)。RARGmRNA高水平组的卵巢癌患者预后更差(P＜0.001)。RARG预测卵巢癌患者1年、5年和9年生存的AUC值分别为0.659、0.616和0.627。单因素和多因素Cox回归分析结果表明，RARGmRNA水平升高是卵巢癌患者预后不良的独立危险因素(P=0.004)。基于RARG和年龄构建Nomogram模型，校正曲线表明该模型的实际观测值与预测值具有良好的一致性。GSEA富集分析提示RARG介导了多种肿瘤相关通路，包括PI3K-Akt信号通路和紧密连接等。免疫浸润分析结果显示，RARGmRNA高水平组中的CD4+T细胞(P=0.018)和中性粒细胞(P=0.028)浸润程度显著低于低水平组。利用qRT-PCR与免疫组化实验检测进一步证实，与正常卵巢组织相比，卵巢癌组织中RARGmRNA水平(P＜0.05)与蛋白表达水平(P＜0.01)均明显升高，且RARG蛋白表达量更高的患者的预后更差(P＜0.01)。单因素和多因素Cox回归分析结果显示，年龄大于65岁(HR=8.883,95％CI=2.264-34.855,P=0.002)、IRS评分大于或等于4分(HR=5.450,95％CI=1.091-27.211,P=0.039)、接受不满意减瘤(HR=3.236,95％CI=1.057-9.909,P=0.040)和铂类药物耐药(HR=7.956,95％CI=1.843-34.345,P=0.005)是预测卵巢癌患者预后不良的独立危险因素。RARG蛋白表达与化疗敏感性有关(P=0.046)。下调RARG表达可以抑制卵巢癌细胞A2780和SKOV3的细胞增殖能力和克隆形成能力，但不影响细胞周期。通过裸鼠皮下移植瘤实验，发现与对照组相比，RARG稳定敲除组的移植瘤体积和重量均显著降低。此外，稳定敲除组中RARG、Ki-67、PCNA的蛋白表达水平也显著低于对照组。<br>　　结论:RARG转录水平和蛋白表达水平在卵巢癌中均显著升高，且RARG高表达是卵巢癌患者预后不良的独立危险因素，RARG是卵巢癌患者预后预测的候选生物标志物。抑制RARG表达可降低卵巢癌细胞的恶性增殖，RARG可能作为卵巢癌患者治疗的潜在分子靶点。