检索历史 清除

摘要第一部分子宫内膜异位症及其分期对行体外受精-胚胎移植治疗的不孕患者的卵母细胞和胚胎质量的影响:一项回顾性病例分析<br>　　目的:子宫内膜异位症是体外受精-胚胎移植(invitrofertilization-embryotransfer,IVF-ET)治疗的适应证之一，但是子宫内膜异位症对接受IVF-ET治疗的不孕患者的卵巢反应、卵母细胞和胚胎质量的影响尚存在争议。本项回顾性研究旨在分析子宫内膜异位症及其分期对接受IVF-ET治疗的不孕患者的卵母细胞和胚胎质量的影响。<br>　　方法:2015年7月至2020年12月在我院生殖中心行IVF-ET治疗的子宫内膜异位症相关不孕症患者和输卵管因素不孕症患者被纳入本项研究。在子宫内膜异位症组，患者根据其病变分期又被分为两个亚组，分别为Ⅰ-Ⅱ期组和Ⅲ-Ⅳ期组。随后我们运用统计学方法分析了不同组别内患者的获卵数、成熟卵母细胞数(MII卵母细胞数)、受精率、卵裂期优质胚胎率、卵裂胚数、囊胚数和囊胚形成率等指标的差异，并且采用广义线性模型排除了混杂因素的干扰，对结果进行了校正。<br>　　结果:本研究共纳入了1312个IVF周期。子宫内膜异位症组患者较输卵管因素不孕组患者有更高的基础卵泡刺激素水平和更大的促性腺激素使用量(P值均＜0.001),并且患者的内异症期别越高，卵泡刺激素水平越高，促性腺激素使用量越大。与输卵管不孕组患者相比，子宫内膜异位症组患者的卵裂期优质胚胎率[平均值分别为12.2％(0％,20％)和10％(0％,16.7％),校正后P=0.038]和受精率[平均值分别为79.5％(66.7％,100％)和75.7％(60％,100％),校正后P=0.008]更低;而两组的获卵数、MII卵母细胞数、卵裂胚数、囊胚数和囊胚形成率则没有显著的统计学差异。根据患者的子宫内膜异位症分期进行分层分析的结果表明，Ⅲ-Ⅳ期子宫内膜异位症患者的获卵数[中位数6(4,9)]相较于Ⅰ-Ⅱ期患者显著减少[中位数8(5,11),校正后P=0.012],并且略微少于输卵管因素不孕组患者的获卵数(校正后P=0.051)。此外，Ⅰ-Ⅱ期子宫内膜异位症患者的卵裂期优质胚胎率最低[平均值9.2％(0％,16.7％)],并且显著低于输卵管因素不孕组患者(校正后P=0.043)。<br>　　结论:本研究的结果表明子宫内膜异位症及其分期可能影响接受IVF-ET治疗的不孕患者的胚胎质量、卵母细胞受精能力和卵巢反应性。<br>　　第二部分子宫内膜异位症相关不孕症患者的卵丘细胞内环状RNAs的测序和生物信息学分析<br>　　目的:子宫内膜异位症通常被认为会损害患者的卵母细胞质量，此外，不同表型的子宫内膜异位症，如卵巢型子宫内膜异位症(ovarianendometriosis,OEM)和腹膜型子宫内膜异位症(peritonealendometriosis,PEM),可能对女性生育力有不同的影响。因此，我们开展本项研究旨在探究不同表型的子宫内膜异位症相关不孕症患者和输卵管因素不孕症(tubalfactorinfertility,TFI)患者的卵丘细胞内环状RNA(circularRNAs,circRNAs)表达谱的差异，并利用生物信息学的方法分析不同表型的子宫内膜异位症损害卵母细胞质量和能力的可能作用机制。<br>　　方法:通过高通量测序的方法，我们测定了OEM组(n=3)、PEM组(n=3)和TFI组(n=3)患者的卵丘细胞内circRNAs的表达谱并且分析了组间的差异，随后，通过取交集的方式寻找到了OEM组和PEM组共有的和各自特有的circRNAs。我们从三个集合中挑选出了7个circRNAs,并使用了实时荧光定量多聚酶链式反应(quantitativereal-timepolymerasechainreaction,qRT-PCR)的方法进行circRNAs相对表达量的验证(样本量n=30)。最终，我们根据验证过的circRNAs构建了circRNA-miRNA-mRNA网络(即竞争性内源性RNA网络)，从而寻找到了circRNAs的靶基因，并对靶基因进行了GeneOntology和KyotoEncyclopediaofGenesandGenomes富集分析，以了解其生物学功能。<br>　　结果:在9个测序样本中，我们共鉴定到11833个circRNAs。OEM组与TFI组相比，共有130个差异表达的circRNAs;在PEM和TFI比较组以及OEM和PEM比较组，差异表达circRNAs的数量分别是71和191个。在对差异表达的circRNAs取交集后，我们发现有11个circRNAs由OEM组和PEM组共享;OEM组特有的circRNAs共计39个，而属于PEM组特有的circRNAs有17个。在qRT-PCR验证阶段，来自PEM组特有circRNAs集合的hsa_circ_0004872,被发现相较于OEM组和TFI组均显著上调。功能分析的结果表明，在PEM-TFI比较组，hsa_circ_0004872的靶基因主要涉及了凋亡信号通路、PI3K-AKT和p53信号通路;而在PEM-OEM比较组，其靶基因主要富集到了JAK-STAT和TGF-β信号通路。<br>　　结论:本项研究的结果证实了OEM和PEM这两个不同表型的子宫内膜异位症不孕患者的卵丘细胞内circRNAs的表达谱存在差异，并且找到了PEM病变损害卵母细胞质量和能力过程中的关键circRNA(即hsa_circ_0004872)和重要的信号通路。